人激活素ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)

試劑盒組成
30 倍濃縮洗滌液 20ml× 瓶 7 終止液 6ml× 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml× 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（00ng/mL） 0.5ml× 瓶
3 酶標(biāo)包被板 2 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 .5ml× 瓶
4 樣品稀釋液 6ml× 瓶 0 說(shuō)明書(shū) 份
5 顯色劑 A 液 6ml× 瓶 封板膜 2 張 
6 顯色劑 B 液 6ml×/瓶 2 密封袋 個(gè)
人激活素ELISA試劑盒標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
50ng/mL 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
25ng/mL 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5ng/mL 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6.25ng/mL 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3.25ng/mL 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔 （空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測(cè)樣品 0µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色0 分鐘.
0. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 5 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。