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小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY圖片

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更新時間:2025-01-12 17:51:02瀏覽次數(shù):708次

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細(xì)胞名稱 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY圖片
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細(xì)胞來自骨髓瘤細(xì)胞系 NS-;由于次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HPRT、HGPRT)和腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(APRT)缺陷導(dǎo)致該細(xì)胞對腺苷和的類似物抵抗。在氨基蝶呤、腺嘌呤和胸腺嘧啶存在的條件下,當(dāng)該細(xì)胞作為永生化細(xì)胞與Rb(8.2)易位的雌性小鼠的B細(xì)胞融合時,會產(chǎn)生Ig重鏈基因位點的陽性選擇;Ig重鏈基因的選擇可使雜交瘤細(xì)胞更穩(wěn)定地合成抗體。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性。

培養(yǎng)條件 RPMI 640 (w/o Hepes) 0%FBS

傳代方法 維持細(xì)胞濃度在2×05~×06 cells/ml之間;2~3天換液次。

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法(-)

STR -

同工酶

染色體 50~60

主要功能:
()小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY圖片血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-和VCAM-,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化:
()主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
()小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY圖片組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×05 cells/ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

運輸和保存:
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY圖片視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
具體操作:
.預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械:保證足夠的*作空間,不僅便于*作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈:注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶,放入微波爐內(nèi)高火,8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞:注意取出細(xì)胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時要在酒精燈上燒口消毒。?

薟精醇 CAS 5940-00- 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

人參皂苷Rk2 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥95%;20mg

(R型)人參皂苷Rg2 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

素二甲 CAS 2906-36-3 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

蒿甲 CAS 7963-77-4 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

白花前胡甲素 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 50mg

3,4,5-三;Gallic CAS 8-4-2 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

棉籽糖 CAS 7629-30-0 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

天名精 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: g

間氨基酚 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 50mg

麥白 CAS 49370-53-6 訂購|咨詢  規(guī)格: 400mg

小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY圖片APAF(NT)  凋亡蛋白活性因子-抗體(N端) 規(guī)格: 0.ml

CLPTM  唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

TWIST protein  TWIST蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml

AKAP5  A激酶錨定蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLF2  肺Kruppel樣因子抗體 規(guī)格: 0.2mlLAPTM4B  溶酶體蛋白跨膜β4抗體 規(guī)格: 0.2ml

SERPINB  蛋白酶抑制劑B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.ml

HER2 receptor  HER2受體抗體 規(guī)格: 0.ml

OXSR  氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/APC  APC標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.ml

Phospho-cdc2 (Tyr5)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體 規(guī)格: 0.mlCKLFSF7/CMTM7  趨化素樣因子超家族成員7抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作流程:
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY圖片主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-43),co2孵箱(日本yamato it-6)。
.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
.2. 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~0倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用0×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于2個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×00%,計算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以×04/孔接種于24孔板,每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)0d,繪制細(xì)胞生長曲線

 

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