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當前位置:上海子實生物科技有限公司>>技術文章>>如何保證CO2培養(yǎng)箱正常運轉
哺乳動物細胞的培養(yǎng)無疑是生物學研究中zui重要的一環(huán)。哺乳動物細胞相對嬌貴,需要特殊的培養(yǎng)環(huán)境。這一環(huán)境主要是由CO2培養(yǎng)箱來提供的。讓你的CO2培養(yǎng)箱正常運作,遠離污染,對細胞的成功培養(yǎng)尤為重要。以下建議來自Eppendorf的產(chǎn)品Charlie Villano。
避免污染
哺乳動物細胞是在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的,并且培養(yǎng)溫度有利于幾乎所有微生物的生長。盡管許多研究人員在培養(yǎng)基中加入抗生素或抗菌素,作為預防措施,但這并不能解決方法上的錯誤,反而掩蓋了潛在的問題。如果可能的話,避免使用這些抗生素,不斷改善你的無菌技術,來保持你的培養(yǎng)箱干凈。
微生物通常是“破門而入”。這雖然是顯而易見的,但要*避免,也沒那么容易。在培養(yǎng)箱中放置東西時,一定要戴上手套,并盡量減少內層玻璃門打開的時間。經(jīng)常用75%的乙醇擦拭門把手。保持濕度盤中的水清潔,每周更換。定期用肥皂和水清洗濕度盤,并用乙醇擦拭,或高壓滅菌。如果培養(yǎng)基灑在了培養(yǎng)箱內,應取出層架*清潔。
清洗工作的頻率取決于你的培養(yǎng)箱使用得有多頻繁。在大型實驗室,培養(yǎng)箱需要經(jīng)常清洗。如果你剛開始用一個干凈的培養(yǎng)箱,又處處小心,那么它可在幾周或幾個月內保持干凈。
保證CO2的水平
大多數(shù)哺乳動物培養(yǎng)基使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。CO2是這一系統(tǒng)中的重要組成部分,必須保持在5%,以維持培養(yǎng)基的生理pH。盡管幾乎所有的培養(yǎng)箱都配備CO2傳感器,但隨著時間的推移,校準會偏離設定點,需要操作人員直接測定CO2來重新校準。測定CO2水平的zui簡單、zui準確方法是使用氣體分析儀,如Fyrite裝置。它們有專門測定CO2或O2水平的型號。
舊型號的培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的重新校準,而的型號每月會進行CO2傳感器的自動歸零。盡管這些型號幾乎不需要手動校準,但用戶也應當用Fyrite裝置來檢測培養(yǎng)室的CO2水平。
維持37℃
哺乳動物細胞也和我們一樣,喜歡37℃的溫度。大部分CO2培養(yǎng)箱都配有顯示器,報告內室的溫度,但定期檢查也是個不錯的主意。使用一個高品質、已校準的溫度計。將溫度計貼在玻璃門的內側,這樣可以從外面讀取溫度,而不用打開玻璃門。在前一天下班前貼上。第二天一早,讀取溫度。重復多次,如果溫度計很準的話,讀數(shù)不是37℃,那就有必要重新校準溫度傳感器。
保持潮濕
培養(yǎng)箱內部的溫度相對較高,因此在沒有高濕度的情況下培養(yǎng)基的蒸發(fā)將是個實際的問題。通過培養(yǎng)箱底部的濕度盤,可維持相對較高的濕度(90%~95%)。但缺點是,裝滿水的濕度盤也是個潛在的污染源。
總之,定期維護和清潔是保持你的CO2培養(yǎng)箱正常運作并遠離污染的zui有效方法。
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