INS-1細胞還是比較好長的，培養(yǎng)條件是RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡萄糖+ 50umol/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS ，細胞本身就是成片生長的，細胞對*比較敏感，如果消化不好，細胞狀態(tài)會受到很大的影響，甚至會不貼壁死亡，我一般用0.05%*-EDTA消化半分鐘就好了

1000mmol=1mol=質量/分子量，你計算好需要的總體積然后根據濃度換算出需要的質量，即克數！
細胞培養(yǎng)階段是用普通1640，也就是含糖11.1mmol/L的培養(yǎng)基，給不同糖濃度刺激時，換用無糖1640配置需要的糖濃度

INS-1細胞的培養(yǎng)條件是：Cell culturing： INS-1 cells were cultured to near confluence in RPMI-1640 medium with 11 mmol/l D-glucose supplemented with 10% fetal calf serum (FCS), 100 U/ml penicillin, 100 ｕg/ml streptomycin, 10 mmol/l HEPES, 2 mmol/l L-glutamine, 1 mmol/l sodium pyruvate, and 50 ｕmol/l b-mercaptoethanol. 可見對葡萄糖濃度的要求是常規(guī)RPMI-1640的GLU濃度，值得一提的是該細胞對2-ME（b-mercaptoethanol）巰基乙醇確實依賴的，如果不添加，細胞難以生長。

INS-1細胞是不難培養(yǎng)的，只是培養(yǎng)基成份多了一些，各位在配培養(yǎng)基的時候要多加小心。
一、細胞株說明
1. 細胞名稱：大鼠胰島素瘤細胞
2. 生長特性：貼壁生長
3. 培養(yǎng)條件：RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡
萄糖+ 50umol/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS
4. 傳代比例：1:3-1:6
5. 培養(yǎng)環(huán)境：37℃，5%CO2,95%O2

賣胰島素細胞的ATCC

通過ATCC現能買到的胰島細胞株有6種，你上面所提的INS-1就有。我就介紹一下該株的一些特性：
Asfari建立了INS-1、INS-2胰島細胞系，其母系是RINm5f（來自于放射線誘導的胰島素瘤）。RIN細胞與淋巴細胞共培養(yǎng)于含β-疏基乙醇的培養(yǎng)基，Asfari發(fā)現一些漂浮的細胞聚集成團，形態(tài)與RIN相異，分離及純化這些細胞即得到INS，這些細胞的活力必須依賴于β-疏基乙醇的存在，其zui大的特點是其激素分泌與體內的胰島細胞相似，具有葡萄糖刺激的胰島素分泌。

一般而言，細胞株胰島素分泌工能越強，轉染效率越差，越容易受損、死亡；相反，若細胞株分化差，分泌胰島素功能很差，轉染效率可能越高，越不容易死亡。另外，若用脂質體轉染時，濃度要低，否則可能死很多細胞；雖然效率可能低些，但是存活率高。

Hans E. Hohmeier , Christopher B. Newgard et al. Cell lines derived from pancreatic islets.Molecular and Cellular Endocrinology 2004,121–1.

葡萄糖刺激的胰島素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)工能
另外，一位經驗豐富的老師（diabetes等雜志發(fā)表過文章）提出忠告: 具有GSIS工能的胰島細胞不容易穩(wěn)定轉染(非常困難) ，瞬時轉染會容易些。

我養(yǎng)過三種胰島B細胞系分別是RIN5F,INS-1,MIN6,前兩者是大鼠胰島B細胞系,MIN6是小鼠的, 其鐘養(yǎng)的是RIN5F,該細胞系一般用來做信號傳導方面的研究. INS-1要復雜一些,據我所知,INS-1的GSIS工能不好,一般不能用來做功能試驗,但是在另有一個INS-1E細胞系,具有一定的GSIS功能,高糖時insulin分泌量/低糖約為3-5倍, MIN6是其鐘GSIS功能的,但也是zui難養(yǎng)的,用它做實驗是一種折磨,我是用原代的胰島細胞來做GSIS功能試驗的.
另外,在進行質粒轉染時,胰島素分泌工能越好的細胞轉染愈難.用脂質體法是不可能轉染上原代胰島細胞的.

我知道華鐘科技大生物物理和化學研究所一是用元代細胞作轉染；另外他們有ins-1胰島β細胞株進行腺病毒轉染，他們實驗室的老板是徐濤教授；方法相對成熟。

HIT-15是錯誤寫法, 應是HIT-T15, 鐘間多一個T, 另外該細胞系的GSIS的zui高倍數是２倍，這種細胞用于工能研究欠考慮．也不是*的功能檢測β細胞系
目前大多用于機制及信號傳導研究