1. 配制培養(yǎng)基時(shí)*和hepes添加量之間沒有必然的。*是必須加的，與培養(yǎng)箱內(nèi)的二氧化碳（溶解在液體內(nèi)就是碳酸）形成碳酸緩沖對。而HEPES是兩性有機(jī)緩沖劑（既可以緩沖酸也可以緩沖堿），其緩沖能力大大高于碳酸緩沖液。
因此，*應(yīng)該按照說明書的劑量加，HEPES作為輔助緩沖，其用量為10-25mmol/L。
2. 培養(yǎng)液的量是否要考慮添加血清的量？各種觀點(diǎn)都有，但不是滲透壓的因素?？梢蕴岣郀I養(yǎng)成分的濃度（曾有2X、4X氨基酸培養(yǎng)的），但效果也不是很明顯?？紤]到現(xiàn)在大多用配好的液體培養(yǎng)液，其配制時(shí)并不考慮血清的量，所以還是應(yīng)該按照1L的量來配。
3. 干粉的zui小包裝必須一次溶解，因?yàn)楦煞鄣幕旌喜皇蔷鶆虻摹９劝滨０钡乃芤翰环€(wěn)定，新配制的不用添加。
另外，培養(yǎng)液溶解后不需調(diào)節(jié)pH，配方是根據(jù)pH7.4組成的，如果溶解后偏堿可以沖入CO2。