2、結果
2.1 給藥途徑對胎盤組織IL26表達的影響陽性反應主要位于絨毛膜層和其近蛻膜的區(qū)域。給藥后第1、2、3天,胎盤組織IL26表達水平,各給藥組低于相應的對照組P<0.05,羊膜腔內(nèi)給藥組低于母鼠靜脈給藥組P<0.05,羊膜腔內(nèi)對照組高于母鼠靜脈給藥組P<0.05。其在給藥組給藥后第2天較低P<0.05,在對照組呈逐漸增長的趨勢P<0.05。
2.2 給藥途徑對胎盤組織MMP29表達的影響陽性反應主要分布于絨毛膜層和靠近蛻膜的區(qū)域。胎盤MMP29表達水平在給藥后第1、2、3天,各給藥組低于各相應對照組P<0.05,羊膜腔內(nèi)給藥組低于母鼠靜脈給藥組P<0.05,羊膜腔內(nèi)對照組高于母鼠靜脈對照組P<0.05。各組MMP29表達水平逐日升高P<0.05。
3 討論
IL26是一種多能炎性細胞因子,與炎癥反應密切相關。IL26產(chǎn)生于滋養(yǎng)細胞,且其受體也存在于滋養(yǎng)細胞表面,宮內(nèi)感染時,細菌侵犯羊膜腔,刺激蛻膜、羊膜和絨毛膜細胞及胎兒產(chǎn)生大量的IL26等細胞因子,可促使PGE分泌,引起子宮收縮和促進宮頸成熟,引起早產(chǎn)。有學者認為,IL26是感染的急性期反應的標志物,其水平甚至可以直接反應病原體的侵入。本實驗結果顯示,給藥組胎盤組織IL26表達水平較低,是為*鈉抗菌作用的體現(xiàn)。給藥途徑不同,導致了羊水即時藥物濃度和其峰值以及藥物代謝過程的差異,我們推測,羊膜腔內(nèi)給藥后,羊水中的藥物濃度瞬時升高至峰值,并可通過擴散、轉運以及羊膜的析出等方式達胎盤,迅速抑制宮內(nèi)大腸埃希菌的生長和繁殖,從而減輕感染帶來的炎癥反應,因此,羊膜腔內(nèi)給藥組胎盤組織IL26表達水平均低于母鼠靜脈給藥組,而羊膜腔穿刺對宮內(nèi)環(huán)境的影響是羊膜腔內(nèi)對照組較母鼠靜脈對照組更高表達的主要原因。
IL26參與妊娠的全過程,并隨孕期而增長,其在孕中、晚期保持一種相對穩(wěn)定的水平,在分娩發(fā)動前明顯升高。本研究顯示,給藥后由于抗菌素的作用,胎盤組織IL26表達于給藥后第2天較低,此后呈增長態(tài)勢,對照組炎性反應程度逐漸增強,IL26水平逐漸上升,這與前人的研究結果保持一致。
基質金屬蛋白酶MMPs是一族內(nèi)源性蛋白水解酶,能夠降解細胞外基質的多種成分,參與細胞外基質的代謝,與組織重塑有關,并通過調節(jié)細胞外基質的含量和胎膜結構,與胎膜破裂關系密切。MMP29激活后,促進包括Ⅳ型膠原在內(nèi)的胞外基質快速崩解引發(fā)細胞發(fā)生形態(tài)學變化和引發(fā)凋亡,其在分娩、破膜、羊膜腔感染的羊水標本中明顯升高。與IL26表達差異原因相同,給藥組MMP29表達水平較低,羊膜腔內(nèi)給藥組低于母鼠靜脈給藥組,羊膜腔內(nèi)對照組高于母鼠靜脈對照組。Locksmith[8]認為,從孕中期至孕末期MMP29一直處于相對穩(wěn)定的較低水平,MMP29的出現(xiàn)和快速增高預示著胎膜即將破裂。又有學者指出感染或炎癥過程中產(chǎn)生的IL26等分泌增加可以誘導或激活MMP29活性,故本實驗各組胎盤MMP29表達水平逐日增高是感染炎癥刺激和妊娠進展共同作用的結果。
目前,羊膜腔途徑給藥作為侵入性操作尚未被臨床廣泛采用,僅胎兒宮內(nèi)換血治療被認可,宮內(nèi)操作導致宮內(nèi)感染風險增加以及胎兒胎盤損傷、早產(chǎn)等副作用使得羊膜腔給藥途徑的研究和應用滯后,上尚無羊膜腔內(nèi)給藥治療宮內(nèi)感染的實驗及臨床研究。然而,羊膜腔途徑給藥可以繞過胎盤屏障直接進入羊水,羊膜腔內(nèi)注射氨基酸治療胎兒宮內(nèi)生長受限成功的報道更堅定了我們探討羊膜腔內(nèi)給藥治療細菌性宮內(nèi)感染的決心。本實驗結果提示,單次*鈉給藥治療晚孕SD大鼠大腸埃希菌宮內(nèi)感染,羊膜腔內(nèi)較母鼠靜脈途徑更有效,其可通過抑制IL26和MMP29在胎盤組織中的表達水平,降低炎癥反應程度和胎膜早破的風險。
