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夾心紅細(xì)胞免疫試驗(yàn)檢測(cè)與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素（LT）

閱讀：314發(fā)布時(shí)間：2011-5-14

此法由Germant等（1987）報(bào)道，其檢測(cè)試劑為CTIgG致敏的綿羊紅細(xì)胞，故反應(yīng)結(jié)果可肉眼直觀。方法是以兔抗CTIgG包被V形聚乙烯板，每孔1OOμL，37□，4h后移至4℃，18h棄去末結(jié)合的抗體，用含O．1％tween-2O的PBS（PBS-T）洗3次，晾干后；加入15Oul熱滅活胎牛血清（5％），37℃作用兒，以封閉未結(jié)合鍵，棄封閉液，再以PBS-T洗滌3次，加入1OOml待檢菌培養(yǎng)物離心上清的濾液（O．22μL），28℃濕盒內(nèi)作用1h，洗滌后加入CT抗體致敏綿羊細(xì)胞（戊二醛法），室溫下靜置2-4h后，按常規(guī)血凝法判定標(biāo)準(zhǔn)觀察反應(yīng)結(jié)果。

經(jīng)與ELISA和Ver。細(xì)胞二法作平行對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果基本一致。但本法簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)，毋需細(xì)胞培養(yǎng)，尤其適用于大量標(biāo)本的檢測(cè)。

 


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