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閱讀:1330發(fā)布時(shí)間:2010-2-21
經(jīng)營:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA測(cè)試盒、透析袋、染色液 正確的使用及保存血清,才能使血清發(fā)揮應(yīng)有的作用。
1.提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。
1.使用前處理:大部分血清在使用前必須滅活處理,即56℃30分鐘。滅活的目的是去除血清中的補(bǔ)體成分,避免補(bǔ)體對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。血清經(jīng)過滅活也會(huì)損失一些對(duì)細(xì)胞有利的成分,如生長(zhǎng)因子,因此也有人提出血清不經(jīng)滅活直接用于培養(yǎng),這樣做的前提是確認(rèn)血清中不含補(bǔ)體成分。對(duì)于一些品質(zhì)高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經(jīng)滅活直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。
2.儲(chǔ)存條件:血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。融化時(shí)現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長(zhǎng)時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。
3.使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,zui常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細(xì)胞系,迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
4.采購血清時(shí),先從供應(yīng)商處索取樣品進(jìn)行試驗(yàn),選定一批后就要保留足夠使用6個(gè)月至1年的量,直至用另一批經(jīng)過預(yù)先試驗(yàn)的樣品代替。
2.提供激素和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素、類固醇激素等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。
3.提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。
4.提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
5.對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止*的消化作用。因?yàn)?已經(jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。
血清的使用與儲(chǔ)存
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