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上海酶聯(lián)生物研究所


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技術(shù)文章

人麻疹Measles IgM ELISA 試劑盒使用說明書

閱讀:486發(fā)布時(shí)間:2012-2-29

用途
本試劑盒用于定性檢測人血清中的Measles IgM抗體。

試劑盒組成(儲(chǔ)存于2-8°C)
酶標(biāo)板 96wells´2 濃縮洗滌液(20X) 60ml
樣品稀釋液 60ml 陰性對照 1 vial
顯色液 30ml 終止液 30ml
校正液 1 vial 酶聯(lián)物 32ml
陽性對照 1 vial 吸收液 24ml

標(biāo)本收集
避免溶血、高血脂標(biāo)本。
標(biāo)本中若有懸浮物,應(yīng)離心去除。
標(biāo)本若不及時(shí)檢測,請凍存于-20°C。

準(zhǔn)備工作
取出所需板條,其余立即密封放回2-8°C。取出的板條應(yīng)放入自封袋內(nèi)(密封)平衡至室溫再試驗(yàn),以防水滴凝聚在冷板條上。
濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至1200ml)。未用完的放回2-8°C。
試劑盒應(yīng)平衡至室溫再試驗(yàn)。所有的操作在質(zhì)控酶標(biāo)板和抗原酶標(biāo)板上同時(shí)進(jìn)行。
血清標(biāo)本、質(zhì)控品、校正液用樣品稀釋液作1:41稀釋,即10ul校正液加入400ul 樣品稀釋液中(10ul 血清加入400ul樣品稀釋液中)?;靹颉H?50ul已1:41稀釋的血清標(biāo)本加入150ul 吸收液,混勻。(取150ul已1:41稀釋的質(zhì)控品/校正液 加入150ul 吸收液,混勻。)室溫放置20分鐘。(zui終稀釋1:81)

試驗(yàn)過程
試劑盒應(yīng)平衡至室溫再試驗(yàn)。所有的操作在質(zhì)控酶標(biāo)板和抗原酶標(biāo)板上同時(shí)進(jìn)行。
加入100ul已稀釋質(zhì)控品至適當(dāng)酶標(biāo)板孔中。
加入100ul已稀釋校正液至適當(dāng)酶標(biāo)板孔中。
加入100ul已稀釋血清至適當(dāng)酶標(biāo)板孔中。
空白孔內(nèi)加入100ul樣品稀釋液,輕輕混勻30秒鐘,封住板孔,室溫20分鐘。
洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加入洗滌液250-300ul,靜止30秒后甩盡液體,在厚疊吸水紙上拍干,洗5次。
每孔加入100ul 酶聯(lián)物, 輕輕混勻30秒鐘,封住板孔,室溫20分鐘。
洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加入洗滌液250-300ul,靜止30秒后甩盡液體,在厚疊吸水紙上拍干,洗5次。
每孔加入顯色液100ul;室溫10分鐘。
每孔加入終止液100ul,混勻,5分鐘后60分鐘內(nèi)在450nm處讀取OD值。

結(jié)果判斷
質(zhì)控品和樣品的OD值應(yīng)減去空白孔的OD值。
抗原酶標(biāo)板上的OD值應(yīng)扣除質(zhì)控酶標(biāo)板上的OD值,取差值。
Cutoff值=校正液Calibrator的OD值´CF(CF標(biāo)于Calibrator上)
Index值=樣品OD值/Cutoff值
Index³1.10為陽性;Index在0.91-1.09間為可疑;Index£ 0.90為陰性。
 


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