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上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀:416發(fā)布時間:2011-06-01
上海酶聯(lián)生物研究所
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使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中極低密度脂蛋白(VLDL)含量。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
120μg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
60μg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
30μg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
15μg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
7.5μg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié):
1.準備試劑,樣品和標準品
2.加入準備好的樣品和標準品,
3.洗板5次,加入酶標試劑,
4.洗板5次,加入顯色液A、B,
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計算
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
商鋪:http://www.niunang.cn/st32881/
主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒
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