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上海酶聯(lián)生物研究所

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現(xiàn)貨人庚肝病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

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人庚肝病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒　　　　　　　　　　　　

本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿

試驗原理：
　　　　HGV-IgG試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知HGV-IgG濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將HGV-IgG和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HGV-IgG的濃度呈比例關系。

自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人庚肝病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

人庚肝病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人庚肝病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

結(jié) 果判斷與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的HGV-IgG標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的HGV-IgG含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-40IU/L

4、敏感度： 0.1 IU/L

4-Hydroxyphenylacetic acid 4-羥基苯乙酸 [156-38-7] 100g
2-（4-Hydroxyphenyl） ethanol 對羥基苯乙醇 [501-94-0] 50g
N-Hydroxyphthalimide N-羥基鄰苯二甲酰亞胺 [524-38-9] 250g
3-Hydroxypicolinic acid 3-羥基-2-吡啶甲酸 [874-24-8] 25g
6-Hydroxypicolinic acid 6-羥基-2-吡啶甲酸 [19621-92-2] 25g
L-Hydroxyproline 反式-4-羥基-L-* [51-35-4] 25g
L-Hydroxyproline 反式-4-羥基-L-* [51-35-4] 100g
Hydroxypropyl-β-cyclodextrin 羥丙基-β-環(huán)糊精 [128446-35-5] 1g
Hydroxypropyl-β-cyclodextrin 羥丙基-β-環(huán)糊精 [128446-35-5] 5g
Hydroxypropyl cellulose 低粘度羥丙基纖維素 [9004-64-2] 250g
Hydroxypropyl cellulose 低粘度羥丙基纖維素 [9004-64-2] 1kg
Hydroxypropyl cellulose 中粘度羥丙基纖維素 [9004-64-2] 250g
Hydroxypropyl cellulose 中粘度羥丙基纖維素 [9004-64-2] 1kg
Hydroxypropyl methyl cellulose 低粘度羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 250g
Kinetin -糠基氨基嘌呤 [525-79-1] 100g
Iron （II,III ） oxide 四氧化三鐵 [1317-61-9] 250g
Isocitrate dehydrogenase 異檸檬酸脫氫酶 / 150U
Hydroxypropyl methyl cellulose 低粘度羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 1kg
Hydroxypropyl methyl cellulose 中粘度羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 250g
Hydroxypropyl methyl cellulose 中粘度羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 1kg
Hydroxypropyl methyl cellulose 高粘度羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 250g
Hydroxypropyl methyl cellulose 高粘度羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 1kg
Hydroxypropyl methyl cellulose 羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 250g
Hydroxypropyl methyl cellulose 羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 1kg
Hydroxypropyl methyl cellulose 羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 10g
Hydroxypropyl methyl cellulose 羥丙基甲基纖維素 [9004-65-3] 100g
8-Hydroxyquinaldine 8-羥基喹哪啶 [826-81-3] 10g
4-Hydroxyquinoline 4-羥基喹啉 [611-36-9] 25g
5-Hydroxyquinoline 5-羥基喹啉 [578-67-6 ] 25g
8-Hydroxyquinoline 8-羥基喹啉 [148-24-3] 100g
8-Hydroxyquinoline 8-羥基喹啉 [148-24-3] 500g
8-Hydroxyquinoline 8-羥基喹啉 [148-24-3] 100g
8-Hydroxyquinoline 8-羥基喹啉 [148-24-3] 250g
8-Hydroxyquinoline 8-羥基喹啉 [148-24-3] 500g
8-Hydroxyquinoline copper salt 8-羥基喹啉銅鹽 [13014-03-4] 25g
8-Hydroxyquinoline hemisulfate salt 8-羥基喹啉硫酸鹽 [134-31-6] 25g
3 α-Hydroxysteroid dehydrogenase 3α-類固醇脫氫酶 / 25U
3 α-Hydroxysteroid dehydrogenase 3α-類固醇脫氫酶 / 100U
N-Hydroxysuccinimide N-羥基丁二酰亞胺 [6066-82-6] 25g

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