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上海酶聯(lián)生物研究所


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免費代測人CXC趨化因子配體9ELISA 檢測試劑盒

閱讀：428發(fā)布時間：2014-02-10

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    上海酶聯(lián)生物研究所

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本試劑僅供研究使用  標本：組織勻漿

 

試驗原理：

CXCL-9試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知CXCL-9濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CXCL-9和*標記的抗體同時溫育。人CXC趨化因子配體9ELISA 檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CXCL-9的濃度呈比例關系。

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。人CXC趨化因子配體9ELISA 檢測試劑盒底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

 

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

 

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的CXCL-9標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的CXCL-9含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

 

3、檢測值范圍：0-800pg/ml

 

4、敏感度： 1.0 pg/ml

大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒 Rat Toll-like receptor 4,TLR4 ELISA Kit Y35250 96T/48T
大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(DAT)ELISA試劑盒 Rat dopamine transporter,DAT ELISA Kit Y35251 96T/48T
大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒 Rat dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit Y35252 96T/48T
大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 Rat amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit Y35253 96T/48T
大鼠CD44分子(CD44)ELISA試劑盒  Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA Kit Y35254 96T/48T
大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒  Rat 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit Y35255 96T/48T
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit Y35256 96T/48T
大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒  Rat insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit Y35257 96T/48T
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 Rat Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit Y35258 96T/48T
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大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit Y35260 96T/48T
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit Y35261 96T/48T
大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 Rat leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit Y35262 96T/48T
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大鼠*Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒  Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit Y35264 96T/48T
大鼠*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit Y35265 96T/48T
大鼠*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit Y35266 96T/48T
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大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒  Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit Y35268 96T/48T
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大鼠煙堿型乙酰*受體(N-AChR)ELISA試劑盒 Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit Y35273 96T/48T
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大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒 Rat α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit Y35277 96T/48T
大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit  Y35278 96T/48T
大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒  Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit  Y35279 96T/48T


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