胃蛋白酶測(cè)試方法

胃蛋白酶（英文名稱：Pepsin）是一種消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主細(xì)胞（gastricchiefcell）所分泌，功能是將食物中的蛋白質(zhì)分解為小的肽片段。胃蛋白酶的前體被稱為胃蛋白酶原。胃腺主細(xì)胞分泌的蛋白酶。初分泌時(shí)為無(wú)活性的胃蛋白酶原，在胃酸或已激活的胃蛋白酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)榫呋钚缘奈傅鞍酌浮?/p>

測(cè)試方法：

取試管6支，其中3支各精密加入對(duì)照品溶液1ml，另3支各精密加入供試品溶液1ml，置37℃±0.5℃水浴中，保溫5分鐘，精密加入預(yù)熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5ml，搖勻，并準(zhǔn)確計(jì)時(shí)，在37℃±0.5℃水浴中反應(yīng)10分鐘。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液備用。

另取試管2支，各精密加入血紅蛋白試液5ml，置37℃±0.5℃水浴中保濕10分鐘， 胃蛋白酶再精密加入5％三氯醋酸溶液5ml，其中1支加供試品溶液1ml，另1支加上述鹽酸溶液1ml，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，分別作為供試品和對(duì)照品的空白對(duì)照，照分光光度法在275nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，算出平均值ＡS和Ａ，按下式計(jì)算。

Ａ×Ｗｓ×ｎ　每1g含蛋白酶活力（單位）＝Ａs×Ｗ×10×181.19式中?。罶為對(duì)照品的平均吸收度；Ａ為供試品的平均吸收度；Ｗs為對(duì)照品溶液每1ml中含酪氨酸的量，μg；Ｗ為供試品取樣量，g；ｎ為供試品稀釋倍數(shù)。在上述條件下，每分鐘能催化水解血紅蛋白生成1μmol酪氨酸的酶量，為一個(gè)蛋白酶活力單位。