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272次 因此如用抗人IgM作為二抗,間接測定IgM抗體,必須先將標(biāo)本用A蛋白或抗IgG抗體處理,以除去IgG的干擾。在臨床IgM時多采用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相,酶聯(lián)免疫試劑盒以捕獲血清標(biāo)本中的IgM(其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM)。然后加入抗原,此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合。繼而加酶標(biāo)記針對抗原的特異性抗體。再與底物作用,呈色即與標(biāo)本中的IgM成正相關(guān)。
此法常用于病毒性感染的早期診斷
1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2)加稀釋的受檢血清,保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,酶聯(lián)免疫試劑盒血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3)加酶標(biāo)抗抗體??捎妹笜?biāo)抗人Ig以檢測總抗體,但一般多用酶標(biāo)抗人IgG檢測IgG抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合,從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量正相關(guān)。
4)加底物顯色
本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷。酶聯(lián)免疫試劑盒間接法的優(yōu)點(diǎn)是只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法。
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