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中級(jí)會(huì)員 | 第16年

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組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA試劑盒分析說(shuō)明

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組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA 檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9.按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。
操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到的結(jié)果。
組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
類(lèi)肌腱蛋白c(TNC)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線(xiàn),樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
DPT     人皮膚蛋白       規(guī)格:  48T/96T
 CTACK/CCL27      人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子       規(guī)格:  48T/96T
 FSA   人胚胎性硫糖蛋白抗原        規(guī)格:  48T/96T
 CIAP 人牛小腸堿性磷酸酶     規(guī)格:  48T/96T
 FⅫ     人凝血因子Ⅻ   規(guī)格:  48T/96T
 FⅩⅢ        人凝血因子ⅩⅢ      規(guī)格:  48T/96T
 FⅩ     人凝血因子Ⅹ   規(guī)格:  48T/96T
 FⅨ     人凝血因子Ⅸ   規(guī)格:  48T/96T
 Ⅷ-Ag        人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原        規(guī)格:  48T/96T
 FⅢ     人凝血因子Ⅲ   規(guī)格:  48T/96T
 FⅡ     人凝血因子Ⅱ   規(guī)格:  48T/96T
 F1+2 人凝血酶原片段F1+2   規(guī)格:  48T/96T
 T-TM 人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物   規(guī)格:  48T/96T
 TR      人凝血酶受體   規(guī)格:  48T/96T
 TAT    人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物    規(guī)格:  48T/96T
 Gelsolin    人凝溶膠蛋白   規(guī)格:  48T/96T
 CLU   人凝聚素    規(guī)格:  48T/96T
 gelson      人凝膠原蛋白   規(guī)格:  48T/96T
 UFC   人尿游離皮質(zhì)醇      規(guī)格:  48T/96T
 ALB   人尿微量白蛋白      規(guī)格:  48T/96T
 UreC 人尿素酶相關(guān)蛋白C     規(guī)格:  48T/96T
 PLAUR/uPAR       人尿激酶型纖溶酶原激活物受體      規(guī)格:  48T/96T
 uPA/PLAU      人尿激酶型纖溶酶原激活物       規(guī)格:  48T/96T
 uPA/PLAU      人尿激酶型纖溶酶原激活物       規(guī)格:  48T/96T
 uPA    人尿激酶型纖溶酶原激活物       規(guī)格:  48T/96T
 UK      人尿激酶    規(guī)格:  48T/96T
 UP      人尿蛋白    規(guī)格:  48T/96T
 GDI    人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子        規(guī)格:  48T/96T
 GEF   人鳥(niǎo)苷酸交換因子 規(guī)格:  48T/96T
 ODC 人鳥(niǎo)氨酸脫羧酶      規(guī)格:  48T/96T
 ODC 人鳥(niǎo)氨酸脫羧酶      規(guī)格:  48T/96T
 OCT   人鳥(niǎo)氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶    規(guī)格:  48T/96T
 FAK   人黏著斑激酶   規(guī)格:  48T/96T
 MAdCAM-1     人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子       規(guī)格:  48T/96T
 BDNF       人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子        規(guī)格:  48T/96T
 BNP   人腦鈉素/腦鈉尿肽        規(guī)格:  48T/96T
 NGB 人腦紅蛋白       規(guī)格:  48T/96T
 ENK   人腦啡肽    規(guī)格:  48T/96T
 BGP/Gehrelin                                       人腦腸肽        規(guī)格:  48T/96T
 visfatin      人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素    規(guī)格:  48T/96T
 vaspin       人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑        規(guī)格:  48T/96T
 EL      人內(nèi)皮脂肪酶   規(guī)格:  48T/96T
 ES      人內(nèi)皮抑素       規(guī)格:  48T/96T
 eNOS-3    人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3        規(guī)格:  48T/96T
 eNOS       人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶    規(guī)格:  48T/96T
 ET-1   人內(nèi)皮素1        規(guī)格:  48T/96T
 ET-1   人內(nèi)皮素1        規(guī)格:  48T/96T
 EG-VEGF       人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子     規(guī)格:  48T/96T
 ET      人內(nèi)毒素    規(guī)格:  48T/96T
 TdT    人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶    規(guī)格:  48T/96T
 TCC C5b-9      人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9    規(guī)格:  48T/96T
 ponticulin        人膜橋蛋白       規(guī)格:  48T/96T
 ANX-Ⅴ     人膜聯(lián)蛋白Ⅴ   規(guī)格:  48T/96T
 MAC 人膜攻擊復(fù)合物      規(guī)格:  48T/96T
 MCP/CD46     人膜輔蛋白       規(guī)格:  48T/96T
 MIS/AMH        人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素     規(guī)格:  48T/96T
 IAP     人免疫抑制酸性蛋白     規(guī)格:  48T/96T
 IgHV 人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)    規(guī)格:  48T/96T
 IgH     人免疫球蛋白重鏈 規(guī)格:  48T/96T
 ILTsR/LIR/CD85   人免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體       規(guī)格:  48T/96T
 λ-IgLC    人免疫球蛋白輕鏈lambda 規(guī)格:  48T/96T
 κ-IgLC    人免疫球蛋白輕鏈kappa抗體 規(guī)格:  48T/96T
 IgM    人免疫球蛋白M      規(guī)格:  48T/96T
 Ig-j      人免疫球蛋白j鏈   規(guī)格:  48T/96T
 IgG    人免疫球蛋白G      規(guī)格:  48T/96T
 Fcγ   人免疫球蛋白G Fc片段     規(guī)格:  48T/96T
 FcγRⅢ/CD16     人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ    規(guī)格:  48T/96T
 FcγRⅡ/CD32     人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ    規(guī)格:  48T/96T
 FcγRⅠ/CD64     人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ    規(guī)格:  48T/96T
 IgE     人免疫球蛋白E      規(guī)格:  48T/96T
 FcεRⅡ/CD23     人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ     規(guī)格:  48T/96T
 FcεRⅠ   人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅰ     規(guī)格:  48T/96T
 IgA     人免疫球蛋白A      規(guī)格:  48T/96T
 FcαRⅠ/CD89     人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ     規(guī)格:  48T/96T
 Irna    人免疫核糖核酸      規(guī)格:  48T/96T
 irGH   人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素        規(guī)格:  48T/96T
 PWM 人美洲商陸素   規(guī)格:  48T/96T
 CED-3      人美麗線(xiàn)蟲(chóng)凋亡基因     規(guī)格:  48T/96T
 ankyrin      人錨蛋白    規(guī)格:  48T/96T
 ATM   人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因     規(guī)格:  48T/96T
 Gliadin-IgA     人麥角蛋白IgA       規(guī)格:  48T/96T
 MV IgM    人麻疹病毒IgM      規(guī)格:  48T/96T
 MV IgG    人麻疹病毒IgG      規(guī)格:  48T/96T
 MV     人麻疹病毒       規(guī)格:  48T/96T
 PF      人落葉型天皰瘡抗體     規(guī)格:  48T/96T
 Helical Peptide      人螺旋肽    規(guī)格:  48T/96T
 RV Ag      人輪狀病毒抗原      規(guī)格:  48T/96T
 OVA sIgG       人卵清蛋白特異性IgG        規(guī)格:  48T/96T
 OVA sIgE       人卵清蛋白特異性IgE 規(guī)格:  48T/96T
人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit,48T/96T      人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit,48T/96T      規(guī)格:       48T/96T
 PEA   人綠膿桿菌外毒素A     規(guī)格:  48T/96T
 TrxR   人硫氧還蛋白還原酶     規(guī)格:  48T/96T
 Trx      人硫氧化還原蛋白 規(guī)格:  48T/96T
 MS     人硫酸褪黑色素      規(guī)格:  48T/96T
 KS      人硫酸角質(zhì)素   規(guī)格:  48T/96T
 HSPG       人硫酸肝素糖蛋白 規(guī)格:  48T/96T
 JE IgG      人流行性乙型腦炎抗體IgG       規(guī)格:  48T/96T
 EP      人流行性腮腺炎      規(guī)格:  48T/96T
 FLU   人流感病毒抗體IgG     規(guī)格:  48T/96T
 FLU A       人流感病毒A   規(guī)格:  48T/96T
 SCCAg     人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原        規(guī)格:  48T/96T

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