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上海通蔚生物科技有限公司
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雞禽流感病毒抗體檢測試劑盒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2016-11-06 05:51:36瀏覽次數(shù):2257次

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雞禽流感病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)使用說明書

【產(chǎn)品名稱】
通用名:雞禽流感病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for Chicken Antibodies to Avian Influenza Virus (ELISA)
【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒
雞禽流感病毒抗體檢測試劑盒【預(yù)期用途】 禽流感又名真性雞瘟或歐洲雞瘟,是由A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽類的一種急性、高度致死性傳染病,以急性敗血性死亡到無癥狀帶毒為特征。
本試劑用于檢測禽類血清中禽流感病毒抗體,可用于免疫效果評(píng)價(jià)、輔助診斷等。
【原    理】
    本試劑盒系由預(yù)包被禽流感病毒抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測雞血清或血漿中禽流感病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí),在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清,經(jīng)溫育后,若樣品中含有禽流感病毒的抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)椋挥妹笜?biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有禽流感病毒抗體。
【試劑盒組成】 

序號(hào)

名稱

規(guī)格(96T×1)

規(guī)格(96T×2)

1.

酶標(biāo)板

96T×1

96T×2

2.

酶標(biāo)記物  (紅蓋)

11ml×1

11ml×2

3.

抗體工作液 (藍(lán)蓋)

5.5ml×1

11ml×1

4.

20X濃縮洗滌液

40ml×1

40ml×1

5.

底物液A  (白蓋)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑蓋) 

6ml×1

11ml×1

7.

終止液  (黃蓋) 

6ml×1

11ml×1

8.

陽性對(duì)照  (紅蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

9.

陰性對(duì)照  (綠蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

10.

蓋板膜

1張

2張

11.

自封袋

1個(gè)

1個(gè)

12.

說明書

1份

1份

 

【儲(chǔ)存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期為12個(gè)月。
包被板開封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個(gè)月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。
【樣品準(zhǔn)備】
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對(duì)照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【檢驗(yàn)方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對(duì)照孔分別加入陰、陽性對(duì)照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陰性對(duì)照≤0.20,陽性對(duì)照≥0.6。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1.C.O(臨界值)=0.13+陰性對(duì)照孔均值(陰性對(duì)照孔均值低于0.07時(shí)以0.07計(jì)算);
2.未曾免疫雞群:樣品A值≥C.O為陽性;樣品A值<C.O為陰性。
3.免疫雞群:監(jiān)測并記錄樣本當(dāng)時(shí)的抗體水平,根據(jù)結(jié)果分析抗體水平的分布及雞群免疫狀態(tài)的動(dòng)向。
【試驗(yàn)方法的局限性】
    該試驗(yàn)僅作為定性檢測雞血清或血漿中禽流感病毒IgG抗體,根據(jù)A值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評(píng)估。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來水沖洗。
3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶,使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以*溶解。
5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號(hào)試劑組分不得混用。

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