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抑制素檢測(cè)原理介紹

時(shí)間:2011/6/7閱讀:285
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抑制素是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β超家族成員,分A、B兩型,由α亞基分別與βA或βB亞基組成,性腺是其主要來(lái)源,能抑制等促卵泡激素垂體后葉激素合成與分泌,調(diào)控紅系前體細(xì)胞增殖。

 

抑制素是一種由女性卵巢顆粒細(xì)胞及男性睪丸支持細(xì)胞分泌的異二聚體蛋白質(zhì)激素。它選擇性抑制卵泡刺激素(FSH)的分泌,對(duì)性腺也有局部旁分泌作用。完整的抑制素分子是一個(gè)分子量約為32KD的分子,由兩個(gè)不同的亞單位(a亞單位和b亞單位)經(jīng)二硫鍵連接而成。卵泡液和血清中也可以發(fā)現(xiàn)a亞單位。此外,游離的a亞單位與b亞單位沒(méi)有生物活性。

 

抑制素的二聚體抑制素BELISA使用一對(duì)高度特異的抗體,僅與有功能的抑制素B分子特異性結(jié)合,不檢測(cè)體液中的游離a亞單位。抑制素B由a亞單位和bB亞單位組成。抑制素B的主要作用是通過(guò)對(duì)FSH的負(fù)反饋?zhàn)饔谜{(diào)節(jié)配子發(fā)育。幾種已發(fā)表的報(bào)告均表明,抑制素B可作為一種內(nèi)分泌標(biāo)記物,通過(guò)對(duì)它的檢測(cè),可以監(jiān)測(cè)男性或女性的性腺功能。

 

抑制素的檢測(cè)原理:

DSL-10-84100ACTIVE®InhibinBELISA試劑盒使用酶增強(qiáng)“雙位點(diǎn)”“兩步”雙抗體夾心免疫測(cè)定法。在實(shí)驗(yàn)中,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控及待測(cè)血清樣本都在包被有抗抑制素bB亞單位抗體的微孔板中孵育。孵育及洗板之后,所有孔都加入*標(biāo)記的抗抑制素a亞單位的檢測(cè)抗體。再孵育及洗板之后,所有孔加入鏈霉和素-辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合物。第三次孵育及洗板之后,加入TMB底物孵育。之后加入終止液,zui后用雙波長(zhǎng)、在450nm及620nm處測(cè)吸光度。測(cè)得的吸光度與抑制素B的濃度成正比。標(biāo)準(zhǔn)品用于描繪吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線,待測(cè)抑制素B的濃度可從此曲線中讀出。

 

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