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鱟試劑的實驗方法

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實驗方法  

鱟試劑按實驗方法可分為: 

①凝膠法鱟試劑?、趧討B(tài)濁度法鱟試劑 ③終點濁度法鱟試劑?、軇討B(tài)顯色法鱟試劑?、萁K點顯色法鱟試劑 

    

      凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量,使用時應(yīng)加除熱原水(細菌內(nèi)毒素檢查用水)復(fù)溶后使用。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應(yīng)的終點。此法操作比較簡單,經(jīng)濟,不需要測定設(shè)備,可以進行定性或半定量測定。 特異性鱟試劑,即棄G因子鱟試劑,是國內(nèi)*的產(chǎn)品, 它專一對內(nèi)毒素起反應(yīng),避免了G因子旁路的干擾,使檢測結(jié)果更加可靠,在藥檢和臨床檢驗方面是*的理想檢測試劑。 

       

       動態(tài)濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑、終點顯色法鱟試劑,這四種方法都是定量檢測內(nèi)毒素的?!「鶕?jù)檢測原理,終點濁度法和動態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化而測定內(nèi)毒素含量的方法。終點濁度法未見商品化產(chǎn)品。動態(tài)濁度法(又稱動態(tài)比濁法)是檢測反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時間,或是檢測濁度增加速度的方法。 終點顯色法和動態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內(nèi)毒素含量的方法,根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度,又稱為比色法。

 

          廈門鱟試劑廠于2005年推出以鱟四肽為顯色底物的鱟試劑盒,抗*力強, 靈敏度高達0.005EU/ml, 質(zhì)量達到水平。目前已有500多家單位使用該試劑盒,并有部分單位發(fā)表相應(yīng)文獻。國內(nèi)有少量國外產(chǎn)品,但價格遠高于國產(chǎn)試劑,到貨周期長?!∪绻鷥H需要檢測樣品的內(nèi)毒素*,可以選擇凝膠法鱟試劑,通過確定內(nèi)毒素限值及zui大有效稀釋倍數(shù),做樣品的干擾試驗從而確定使用的鱟試劑的靈敏度?!∪绻枰繙y定樣品中內(nèi)毒素含量則應(yīng)選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動態(tài)濁度法鱟試劑?!討B(tài)濁度法與動態(tài)顯色法需要帶溫育系統(tǒng)的動態(tài)光度測定儀器及配套軟件,例如,微板鱟試儀ELx808及軟件TALgent 或Gen5。動態(tài)濁度法與動態(tài)顯色法簡單方便、一步即成,線性范圍寬?!〗K點顯色法需要配套酶標儀或可見分光光度計進行檢測。配套帶有溫育系統(tǒng)的酶標儀,如微板鱟試儀ELx808,可減少試劑用量。

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