elisa試劑盒,人elisa試劑盒操作方法

        ELISA 是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。ELISA 試劑盒操作方法，Elisa試驗(yàn)廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中，那么Elisa試驗(yàn)有沒(méi)有簡(jiǎn)單便捷的操作方法呢？

 人ELISA試劑盒操作方法：用于檢測(cè)未知抗體的間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至 1～10μ g／ml，每孔加 0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌 3 次。

2.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml 于上述已包被之反應(yīng)孔中,置 37℃孵育 1 小時(shí), 洗滌。 （同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）

3.于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育 30-60 分鐘，洗滌, zui后一遍用 DDW 洗滌。

4.于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的 TMB 底物溶液 0.1ml，37℃ 10～30 分鐘

5.于各反應(yīng)孔中加入 2M 硫酸 0.05ml 6.可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為 無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”“-”號(hào)表示。也可測(cè) OD 值：在 ELISA 檢測(cè) 、 儀上，于 450nm（若以 ABTS 顯色，則 410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔 OD 值， 若大于規(guī)定的陰性對(duì)照 OD 值的 2.1 倍，即為陽(yáng)性。