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技術文章

可的松ELISA 試劑盒(尿液*)

閱讀:637發(fā)布時間:2014-4-4

實驗原理

樣本中的尿液*與辣根過氧化物酶標記的*競爭連結到包被板中的抗*抗體。

溫育后,經(jīng)洗滌,連結的與游離的*分開。加入H2O2和TMB底物液,經(jīng)一段時間后,生成了顏色,加入終止液終止酶促反應并檢測吸光度。計算尿液中*需要一系列的標準品建立標準曲線。樣本中尿液*濃度與顏色強度成正相關。

試劑、材料和儀器

提供的試劑和材料

1 *標準品 STD0-STD4

2 孵化緩沖液

  磷酸鹽緩沖液

3 酶聯(lián)物 HRP標記的*

4 包被板,可分拆

5 TMB底物液

6 終止液

7 質控品(低)

8 質控品(高)

儀器

移液器

酶標儀(450nm)

 

實驗步驟: 略

 

結果

平均吸光度

計算標準品、樣本的平均吸光度值。

標準曲線

以標準品吸光度值為Y軸,相應的濃度為X軸,作出*的擬合曲線(可選擇4參數(shù)邏輯函數(shù))。

計算結果

將樣本的吸光度值插入標準曲線中,則可讀出相應的濃度,單位為ng/ml。

計算尿液中*濃度(24h),按以上計算出濃度,然后再乘以24小時內(nèi)的尿液總體積

ng/ml x 24小時尿液體積(ml)/1000=µg Cortisol/24h

參考值

50—190µg/24h


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