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技術(shù)文章

蛋白質(zhì) 酶和核酸分離與純化的一些方法

閱讀：1002發(fā)布時間：2011-5-14

從細胞中提取出來的生物大分子是不純凈的，必須進一步分離純化才能獲得純品。在生物大分子制備工作中，分離純化是比較復雜和重要的一個環(huán)節(jié)。

對于異類的物質(zhì)，如提純蛋白質(zhì)和酶時混雜著核酸，提純核酸時混雜著蛋白質(zhì)或多糖，一般可用專一性酶水解、有機溶劑抽提、選擇性分部沉淀等方法處理，小分子物質(zhì)常在整個制備過程中多次液相與固相互相轉(zhuǎn)化被分離或zui后用透析方法除去。

而對同類物質(zhì)，如酶和雜蛋白，RNA和DNA以及不同結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)、酶、核酸之間的分離，情況則復雜得多，主要應用的方法有鹽析法、有機溶劑沉淀法、等電點沉淀法、吸附法、結(jié)晶法、電泳法、超速離心法、柱層析法等。其中鹽析法、等電點法、結(jié)晶法用于蛋白、酶的提純較多；有機溶劑抽提和沉淀用于核酸提純較多；柱層析法、梯度離心法在蛋白質(zhì)和核酸的提純工作中應用均十分廣泛。

 


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