濃縮是低濃度溶液通過除去溶劑（包括水）變?yōu)楦邼舛热芤旱倪^程，在制備生物大分子及各種生化產(chǎn)品時，常在提取后和結(jié)晶前進行濃縮，有時也貫穿在整個制備過程中。沉淀（包括鹽析和有機溶劑沉淀），廣義上來說也是一種濃縮方法，經(jīng)過沉淀再溶解，濃度可大大提高，但有時提取液很稀，體積又很大或結(jié)晶前除去少量溶劑，則常用其他方法濃縮。
1．蒸發(fā)法 液體在任何溫度下都在蒸發(fā)，蒸發(fā)是溶液表面的溶劑分子獲得動能脫離液面逸向空間的過程。當(dāng)溶液受熱，液體中溶劑分子動能增加，蒸發(fā)過程加快。蒸發(fā)的快慢和溫度、蒸發(fā)面積、液體表面積、液面蒸汽分子密度，即蒸汽壓大小有關(guān)。各種液體在一定溫度下都具有一定飽和蒸氣壓，當(dāng)液面上的溶劑蒸氣分子密度很小，經(jīng)常處于不飽和的低壓狀態(tài)，液相與氣相的溶劑分子為了維持其分子密度的動態(tài)平衡狀態(tài)，溶液中的溶劑分子就必須不斷地氣化逸出空間，以維持其一定的飽和蒸氣壓力。因此，根據(jù)上述原理，蒸氣濃縮裝置常按照加熱、擴大液體表面積、低壓和加速空氣流動等因素而設(shè)計的。
2．冰凍法 冰凍法也是生物大分子及其他有機化合物濃縮的一種有效方法。生物大分子在冰凍時，水分結(jié)成凍，鹽類及生物大分子不進入冰內(nèi)而留在液相中。操作時先將待濃縮的溶液冷卻使之變成固體，然后緩慢地融解，利用溶劑與溶質(zhì)融解點的差別而達到除去大部分溶劑的目的。如蛋白質(zhì)和酶的鹽溶液，用此法濃縮時，不含蛋白質(zhì)和酶的純冰結(jié)晶浮于液面，蛋白質(zhì)和酶則集中于下層溶液中，移去上層冰塊，可得蛋白質(zhì)和酶的濃縮液。
吸收法 是一種通過吸收劑直接吸收溶液中的溶劑分子使溶液濃縮的方法。使用的吸收劑必須與溶液不起化學(xué)反應(yīng)，對生物大分子不起吸附作用，易與溶液分開，吸收劑除去溶劑后能重復(fù)使用。實驗室中zui常用的吸收劑有聚乙二醇、聚乙烯吡咯酮、蔗糖和凝膠等。使用凝膠時，首先選擇凝膠粒度大小恰好溶劑及低分子物質(zhì)能滲入凝膠內(nèi)，而生物大分子卻*排除于凝膠之外的，然后將洗凈和干燥的凝膠直接投入待濃縮的稀溶液中，凝膠親水性強，在水中溶脹時，溶劑及小分子被吸收到凝膠內(nèi)，生物大分子留下剩余的溶液中，離心或過濾除去凝膠顆粒，即得已濃縮的生物大分子溶液。凝膠溶脹時吸收水分及小分子物質(zhì)可同時起到濃縮及分離純化兩種作用，對生物大分子結(jié)構(gòu)和生物活性都沒有影響。是近年來生物化學(xué)及分子生物學(xué)日益廣泛使用的濃縮和分離方法之一。
使用聚乙二醇等其他吸收劑時，需先將生物大分子溶液裝入半透膜的袋里，扎緊袋口，外加聚乙二醇復(fù)蓋，袋內(nèi)溶劑滲出即被聚乙二醇迅速吸去，聚乙二醇被溶劑飽和后，可更換新的，直到濃縮至所需的濃度為止。用完一次以后的聚乙二醇經(jīng)過加熱除去溶劑便可再次使用。
4．超濾法 超濾法是使用一種特制的薄膜對溶液中各種溶質(zhì)分子進行選擇性過濾的方法。當(dāng)溶液在一定壓力下（外源氮氣壓或真空泵壓）通過膜時，溶液和小分子透過，大分子受阻保留于原來溶液中，其原理如圖2—2所示。這一近年發(fā)展起來的新方法是適于生物大分子尤其是蛋白質(zhì)和酶的濃縮或脫鹽，并具有成本低、操作方便、條件溫和、能較好地保持生物大分子生理活性、回收率高等優(yōu)點。除去濃縮、脫鹽外，并可應(yīng)用生物大分子的分離純化，是目前民展較快且為人們所采用的生化技術(shù)之一。
圖2-2 超濾法示意圖
通過超濾法，蛋白質(zhì)和酶的稀溶液一般可濃縮到10%～15%濃度，回收率高達90%。超濾法應(yīng)用關(guān)鍵在于膜選擇。不同類型的規(guī)格的膜、水的流速（在規(guī)定壓力下以ml/cm2/h或分表示）、分子量截止值（即大體上能被膜保留分子zui小分子量數(shù)值）等參數(shù)均不同，必須根據(jù)工作的需要來選用。此外，超濾裝置形式、溶質(zhì)成分及性質(zhì)、溶液濃度及粘度都對超濾的效果有一定影響。
制品濃縮到一定程度，即可貯存，如有必要可采用低溫干燥（冰干）的方法除去制品中溶劑，使之成干粉。
制品的貯存可分干態(tài)貯存和液狀貯存。但不論是何種方法貯存，都要避免長期暴露在空氣中，防止微生物的污染。溫度對生物活性物質(zhì)的活性影響很大，在絕大多數(shù)情況下應(yīng)采取低溫保存。
干態(tài)儲藏：干燥的制品一般比較穩(wěn)定，如制品含水量很低，在低溫情況下，生物大分子活性可在數(shù)個月甚至數(shù)年沒有顯著變化。儲藏方法也很簡單，只將干燥后的樣品置于干燥器內(nèi)（內(nèi)裝有干燥劑）密封，保持0～4℃冰箱中即可。有時為了取樣方便和避免取樣時樣品吸水和污染，可先將樣品分裝成許多小瓶中，每次用時，只取一小瓶。
液態(tài)儲藏：液態(tài)儲藏的優(yōu)點是使樣品減去干燥這一步驟，生物大分子的生理活性和結(jié)構(gòu)破壞較少，缺點是需要較嚴格的防腐措施，儲藏時間不能太長。如樣品量大時封裝運輸不方便，實驗室常采取少量安瓿封存方法。液態(tài)儲藏注意事項如下：
樣品不能太稀，必須濃縮至一定濃度后才能封裝儲藏，樣品太稀時容易引起生物大分子變性作用。
一般需加入防腐劑和穩(wěn)定劑，常用防腐劑有甲苯、苯甲酸、氯仿等。蛋白質(zhì)和酶常用的穩(wěn)定劑有蔗糖、甘油等，如酶也加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性，此外鈣、鋅、硼酸等鹽溶液對某些酶也具有一定保護作用。核酸大分子一般保存在氯化鈉或檸檬酸與氯化鈉的標準緩沖液中。
儲藏溫度要求較低，大多數(shù)在0℃左右冰箱保存即可，有的則要求更低溫度。但注意某些具有活性的大分子如DNA溶液低溫保存時，有宜使溶液結(jié)冰以造成其分子結(jié)構(gòu)被破壞，另也有文獻報道某些蛋白質(zhì)和酶在低溫中反而引起變性。故應(yīng)分別情況對待，不能一概而論。
生物大分子和各種生化制品的儲藏和保存，總的來說，溫度和水分是影響穩(wěn)定性的兩個重要因素，其次是各種穩(wěn)定劑的應(yīng)用是否適當(dāng)關(guān)系也很大。實際應(yīng)用時，必須對各方面都加以考慮。
所提取、純化的抗原物質(zhì)，在使用前應(yīng)進行定量測定。定量測定的方法，可根據(jù)不同的物質(zhì)，選擇合適的方法進行。
某些分子量較小的抗原，如肽類半抗原，由于其結(jié)構(gòu)較為簡單，目前已有化學(xué)合成的純品供應(yīng)，不必自己去從組織中提取?；瘜W(xué)合成是一項專門技術(shù)，可參閱有關(guān)書籍。
