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熱誘導(dǎo)的抗原修復(fù)（AR）的影響因素

閱讀：723發(fā)布時間：2011-10-17

AR的影響因素很多，但zui主要的還是溫度和抗原修復(fù)液的pH值。

Biddol等（1999）三實驗結(jié)果已證實，要想獲得滿意的結(jié)果，溫度是zui為重要的影響因素。將存檔的蠟塊作連續(xù)切片，利用4種抗原修復(fù)介質(zhì)，其中包括檸檬酸緩沖液、EDTA、Tris鹽和金屬緩沖液，二十種不同一抗，抗原修復(fù)溫度采用室溫和37~C，時間為8—72h，結(jié)果全部為弱陽性或陰性：當(dāng)然也不能排除將切片浸在緩沖液中更長時間（幾個月或幾年）可以獲得滿意結(jié)果的可能性。

Shi等（2001）的實驗結(jié)果也證實，溫度與修復(fù)時間呈負(fù)相關(guān)。另外，抗原修復(fù)液的：H值也是一個相當(dāng)重要的影響因素，一般抗原修復(fù)液pH值為6．0或8．5。

雖然，抗原修復(fù)技術(shù)zui主要的影響因素是溫度和pH值，但也不能忽視其他的影響因素．例如修復(fù)方式、修復(fù)介質(zhì)和修復(fù)時間。作者實驗室用改進(jìn)的CSA（催化信號放大）方法檢測p331Ncl在胃癌和肝癌中的表達(dá)，單獨用pH6．0檸檬酸緩沖液（CB）或pH8．0 ED—TA作抗原修復(fù)液，其陽性產(chǎn)物極大部分在細(xì)胞漿內(nèi)表達(dá)；當(dāng)CB和EDTA聯(lián)合應(yīng)用時，其陽性表達(dá)極大部分在核內(nèi)，陽性率也提高。該結(jié)果說明對于個別抗原的檢測，尤其是基因產(chǎn)物，抗原修復(fù)液的選擇也相當(dāng)重要。


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