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技術(shù)文章

免疫球蛋白IgE的提取分離純化技術(shù)

閱讀：2236發(fā)布時(shí)間：2011-12-10

（一）材料與試劑
1．血清
2．飽和硫酸銨溶液
3．洗脫液0.005Mol/L pH7.4PB液
0.025 Mol/L pH7.4PB液
0.01Mol/L pH7.4PBS液（0.14mol/L NaCl）
4．DE52
5．SephadexG150

（二）操作方法
1．取血清倍比稀釋后，加等量飽和（NH4）2SO4溶液，鹽析。
2．離心取沉淀，溶于少量生理鹽水中，透析、除鹽。
3．過(guò)DE52柱，以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脫，收集洗脫蛋白峰（IgG），棄去。
4．換以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脫，洗下的蛋白峰主要是IgE。
5．透析除鹽。
6．過(guò)G150柱，以0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl）洗脫，收集洗脫液即為純化的IgE。
7． 濃縮、鑒定。


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