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技術(shù)文章

捕獲法ELISA檢測HBsAg/C3-CIC

閱讀:842發(fā)布時間:2012-2-2

抗原/C3是所有激活補體的抗原類CIC的總和,如以抗C3為包被抗體,則對探討某類抗原特異性IC的病理作用具有重要意義。現(xiàn)將捕獲法ELISA檢測HBsAg/C3—CIC介紹如下:

在聚苯乙烯微量反應(yīng)板內(nèi)加入抗人C3的羊IgG,0.1ml/孔(10ug/mL),4℃作用24h。用PBST洗滌3次;加入0.1mL用生理鹽水按l:10稀釋的待檢血清,每份標本2復(fù)孔,同時設(shè)陰、陽性對照,置4cC24h。同上洗滌,加0.1mLHRP-抗HBs(用含10%羊血清的PBST稀釋),25℃作用4ho同上洗滌,加0.1mL新鮮配制的OPD-H202底物溶液,25℃反應(yīng)15min;加0.05mL2mol/LH2S04終止反應(yīng)。用酶標儀測492nmOD值,根據(jù)2復(fù)孔的OD值,以P/N值大于或等于2.1者判斷為HBsAg/C3-CIC陽性。

臨床意義:HBsAg/C3-CIC陽性率與肝損傷嚴重程度明顯相關(guān),表明其可能在HBV引起慢性活動性肝炎、重癥肝炎和肝炎后肝硬化的發(fā)病過程中起重要作用。在慢性肝病患者中,HBeAg陽性者,HBsAs/C3-CIC的檢出率顯著高于HBeAg陰性者;在聚合人白蛋白受體(PHSAR)陽性者中檢出率亦顯著高于PHSAR陰性者。而急性乙肝的HBsAg/C3-CIC在HBV感染的急、慢性肝病中具有不同的病理生理意義。


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