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技術文章

ELISA檢測腎綜合征Ag/IgE和Ag/IgD-CIC

閱讀：547發(fā)布時間：2012-2-18

抗原抗體雙特異性CIC是同一抗原與不同Is類型抗體IC的集合。其操作步驟如下：兔抗人ISD用0．1mol/L，pH9．6碳酸鹽緩沖液稀釋(終濃度分別為5ug/mL與10ug/mL)，加入40孔聚苯乙烯反應板，每孔0．2mL，43℃包被過夜。

用洗滌液PBST(0．01mol／LpH7．4PBS含0，05％Tween-20)洗3次，加入1：2稀釋的待檢血清(稀釋液為含10％NCS的PBST)，37℃作用2h，洗滌3次。加入適當稀釋的HRP標記的兔抗?jié)h坦病毒抗體，37％作用2h，洗滌3次。加入OPD-H202底物液，顯色10—15rain，用2mol/H2S04終止反應。將反應板置酶聯(lián)免疫檢測儀讀取492nmOD值。以P／N大于或等于2．1為陽性。

臨床意義：IsE和IgD兩型CIC檢出率的動態(tài)變化相似，即疾病早期較高，4～8病日達高峰，此后漸降。不同病型腎綜合征出血熱患者兩型CIC檢出情況與病情輕重有密切關系，提示此兩型CIC參與了對漢坦病毒的清除及免疫病理反應。


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