IL-10由輔助性T細(xì)胞亞群THl和TH2，單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞（keratinocyte）產(chǎn)生。其生物活性廣泛，可選擇性地抑制單核一巨噬細(xì)胞的某些功能，對(duì)T細(xì)胞、B細(xì)胞等的功能亦有明顯影響?，F(xiàn)已獲得重組的鼠和人IL-10及其特異性McAb。B細(xì)胞等在正常狀態(tài)下可分泌一定量的IL-10，用LIS刺激可使其產(chǎn)量明顯增加，誘生高峰在孵育18h后。
（一）ELISA試驗(yàn)
用IL-10McAb包被反應(yīng)板，以*結(jié)合的第二抗體進(jìn)行夾心法ELISA檢測(cè)IL-10活性或含量。
（二）生物活性測(cè)定法
可根據(jù)IL-10對(duì)抗原刺激THl細(xì)胞產(chǎn)生IFN-7的抑制作用測(cè)定其活性。若不能維持培養(yǎng)Tul細(xì)胞，可用PHA刺激的脾細(xì)胞代替。
1．向96孔培養(yǎng)板每孔加50／zLRPMI-1640和50ul待測(cè)標(biāo)本，并設(shè)置IL-10標(biāo)準(zhǔn)品（40ne／mL）對(duì)照，每一標(biāo)本及對(duì)照組均設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。
2．混勻后，自H排每孔取50gL加入G排，混勻后，自G排每孔取501~L加入F排，如此類(lèi)推直至B排，A排作為陰性對(duì)照。
3．以2 500rad~C。照射鼠脾細(xì)胞，洗滌并計(jì)數(shù)，用RPMI-1640調(diào)整細(xì)胞濃度至2X107／mL。
4．用RPMI-1640洗THl細(xì)胞，用含抗原的培養(yǎng)液（終濃度為0．04％雞紅細(xì)胞）調(diào)整細(xì)胞濃度至2X106／mL。
5．將步驟（3）和（4）所得脾細(xì)胞和T細(xì)胞等體積混合，如可能存在IL-2、IL-4或TGF-b時(shí)，加相應(yīng)MeAb對(duì)照（抗IL-4 5弘g／mL；抗IL-2 2ng／mL；抗TGF-p10ng／mL）。
6．每孔加501aLT細(xì)胞、脾細(xì)胞、抗原混合液，37~C C02溫箱中培養(yǎng)24h。
7．從每孔中取上清50／uL（注意勿吸出細(xì)胞），測(cè)上清的IFN-r，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，并計(jì)算IL-10濃度。
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