IL-7主要由骨髓基質(zhì)細胞產(chǎn)生，對B前體細胞的增殖及T細胞的發(fā)育有刺激作用。由于IL-7來源局限，主要為骨髓基質(zhì)細胞及IXN／A6細胞系，因此，現(xiàn)多采用基因工程技術(shù)，從轉(zhuǎn)染含IL-7eDNA表達質(zhì)粒的哺乳類細胞培養(yǎng)上清中獲取。
（一）依賴細胞株增殖法
IL-7的依賴細胞株為Clone-K和“N／2bx，具體步驟參照IL-2檢測。
（二）B前體細胞短期培養(yǎng)增殖法
1．取小鼠骨髓，制成單細胞懸液，經(jīng)兩次貼壁去除粘附細胞，將懸浮細胞離心后再重懸于1—2mL含5％FCS的IMDM培養(yǎng)液中。
2．將細胞通過SephadexG-10柱（0．5—1X 5～10em），室溫靜置10rain，以去除殘余的粘附性或基質(zhì)細胞；用培養(yǎng)液洗脫收集的細胞即為B前體細胞，洗滌后調(diào)整細胞濃度為2．5X105／mL。
3．將待測樣品在96孔培養(yǎng)板內(nèi)依次稀釋，每孔lOOgL，每個稀釋度設(shè)3復(fù)孔，并設(shè)陰性對照及陽性對照；然后每孔加入100~LB前體細胞，5％C02，37℃培養(yǎng)48h，終止培養(yǎng)前4～8h每孔加入0．5uCi3H-TdR/20uL。
4．收集細胞測定cpm值。
（三）活化的胸腺細胞增殖法
IL-7可促進ConA活化的胸腺細胞增殖，用以檢測重組IL-7的生物活性。由于IL-1、IL-2、IL-4對活化的胸腺細胞也有促增殖作用，故用此方法檢測混合培養(yǎng)上清標(biāo)本時應(yīng)用相應(yīng)的中和抗體作阻斷試驗。
1．制備BALB／C小鼠胸腺細胞懸液，用含0．5～5ug／mLConA的*DMEM培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為1×107mL。
2．于96孔培養(yǎng)板中每孔加入100uL胸腺細胞懸液，分別加入IL-7檢測樣品和一系列稀釋的IL-7標(biāo)準(zhǔn)品，每個樣品設(shè)3復(fù)孔。
3．37C，5％C02溫箱培養(yǎng)48h，采用3H-TdR摻入法或比色法測定細胞增殖反應(yīng)，并計算IL-7活性單位。
4．注意事項：實驗前應(yīng)先選擇一個單獨使用促增殖作用zui低，但與IL-7一起使用有zui大增殖作用的ConA濃度。
