IL-2主要由活化的CD4+細胞產(chǎn)生，通過自分泌和旁分泌作用于分泌IL-2的細胞本身或鄰近的CD4+和CD8+細胞，是機體免疫網(wǎng)絡(luò)中zui重要的調(diào)節(jié)因子。因此，IL-2活性的檢測已成為評價機體免疫功能的重要指標之一。但體液中IL-2含量甚少，難以直接測定。通常檢測PHA和ConA等絲裂原誘導單個核細胞在體外產(chǎn)生IL-2的能力來反映。
體外誘生和制備IL-2可用正常組織細胞（如人脾臟、扁桃體、淋巴結(jié)）及外周血單個核細胞，大鼠和小鼠脾臟細胞，各種傳代細胞系（如人白血病Jurkat細胞系，小鼠胸腺瘤EL-4細胞系，長臂猿淋巴肉瘤MLA-144細胞系等）和一些T細胞雜交瘤。
1．人外周血單個核細胞誘生IL-2
（1）無菌取靜脈血5mL，肝素抗凝。用淋巴細胞分層液密度梯度離心（2 000r／min×30min），分離單個核細胞。
（2）用Hanks液洗滌細胞2次，然后用含10％NBS的RPMI-1640*培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為1×106／mL。
（3）于24孔培養(yǎng)板中，加入細胞懸液lmlJ孔，PHA 100pz／孔。
（4）37℃5％C0：條件下培養(yǎng)48h。
（5）吸出培養(yǎng)上清，2000r／rain離心20rain，收集上清，—20~C凍存待測。
2．小鼠和大鼠脾臟細胞誘生IL-2
（1）將小鼠拉頸致死，無菌操作取脾臟。仔細剪碎，加適量的Hanks液混懸，經(jīng)100目篩網(wǎng)過濾，獲得單個脾細胞：
（2）低滲或0．83％氯化銨處理，裂解殘余紅細胞。
（3）以含2％NBS的HBSS離心洗滌2次，用含10％NBS的RPMI-1640*培養(yǎng)液配制成5×106／mL脾細胞懸液，加入ConA使zui終濃度為5～10pg／mL。置37％，5％C02溫箱中培養(yǎng)24—48h（視細胞轉(zhuǎn)化情況而異）。
（4）離心沉淀，收集上清。—20~C凍存待測。
3．MLA-144細胞和EL-4細胞誘生ID2 MIA—144細胞可以自發(fā)分泌IL-2，按以下條件培養(yǎng)：起始細胞濃度為2X105／mL，終末濃度為1X106／mL，傳代時間為48h：
EL-4細胞在十四酰佛波乙酸酯（tetmdecanoylphorbolacetate，TPA）刺激下可產(chǎn)生價11,-2。TPA為10ng／mL，起始細胞濃度為106／mL，培養(yǎng)48h，收集上清：
4．注意事項
（1）誘生劑濃度、培養(yǎng)條件和細胞濃度對結(jié)果均有明顯影響，應(yīng)進行預試驗以確定*實驗條件。
（2）培養(yǎng)器皿和研磨條件：24孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞活率較高，但生長稍慢。玻璃瓶培養(yǎng)有時會因玻璃質(zhì)量和清洗不凈引起細胞死亡，故應(yīng)注意采取相應(yīng)措施。大量培養(yǎng)時用大容量瓶比較方便，可減少操作中的污染。研磨組織可用玻璃勻漿器、不銹鋼網(wǎng)和毛玻璃
