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中國醫(yī)學(xué)*文章:RNAi技術(shù)解析病毒

時(shí)間:2013-7-26閱讀:257
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生物通“核心刊物”迎來了新期刊:科學(xué)通報(bào),中國科學(xué)C輯:生命科學(xué),這兩份期刊均是由*和*共同主辦的,我國學(xué)術(shù)期刊中的,被國內(nèi)外各主要檢索系統(tǒng)收錄,如國內(nèi)的《中國科學(xué)論文與引文數(shù)據(jù)庫》(CSTPCD)、《中國科學(xué)引文數(shù)據(jù)庫》(CSCD)等;美國的SCI、CA、EI,英國的SA,日本的《科技文獻(xiàn)速報(bào)》等。目前針對每期的重點(diǎn)內(nèi)容,生物通將展開詳細(xì)推薦,歡迎讀者共同參與…… 
生物通報(bào)道:腸道病毒71型(EV71))已被證明是引起近年來亞洲-太平洋地區(qū)頻發(fā)的手足口病重癥并導(dǎo)致患者死亡的zui主要病原體。但是, 其是如何感染神經(jīng)系統(tǒng)并導(dǎo)致嚴(yán)重神經(jīng)系統(tǒng)病理損傷的分子機(jī)制尚不明確。來自中國醫(yī)學(xué)*&北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,昆明醫(yī)科大學(xué)等處的研究人員通過RNAi技術(shù)對 EV71 病毒感染恒河猴星狀膠質(zhì)細(xì)胞所需細(xì)胞磷酸酶譜進(jìn)行了分析,比較了EV71在該細(xì)胞中的增殖特征,并對若干可以通過其表達(dá)水平及其活性的變化而直接影響 EV71 增殖的磷酸酶做了進(jìn)一步分析。
結(jié)果表明, 恒河猴星狀膠質(zhì)細(xì)胞中若干與調(diào)控信號通路相關(guān)的*磷酸酶和絲/*磷酸酶對 EV71 的增殖具有調(diào)控作用, 而病毒亦可能通過與這些磷酸酶的相互作用對所感染的星狀膠質(zhì)細(xì)胞的免疫反應(yīng)性產(chǎn)生相應(yīng)的影響。小RNA病毒科成員腸道病毒71型(EV71)作為引起兒童手足口?。╤and foot and mouth disease, HFMD)的常見病原體, 同時(shí)因其也是該病重癥及死亡病例的主要病原而受到廣泛關(guān)注。星狀膠質(zhì)細(xì)胞作為 CNS 中膠質(zhì)細(xì)胞的主要類型, 不僅具有重要的神經(jīng)組織支持作用, 同時(shí)亦具有重要的神經(jīng)細(xì)胞調(diào)節(jié)作用和免疫反應(yīng)功能。
此前這一研究組已證明, EV71 能夠通過 PSGL-1介導(dǎo)而進(jìn)入該細(xì)胞, 并表現(xiàn)感染增殖過程(數(shù)據(jù)投稿中)。但此感染過程如何影響該細(xì)胞的生理功能尚不清楚. 由于星狀膠質(zhì)細(xì)胞具有較復(fù)雜的神經(jīng)調(diào)節(jié)功能及免疫反應(yīng)能力,在這篇文章中,研究人員就進(jìn)一步探索病毒與該細(xì)胞相互作用的基礎(chǔ), 集中于這類細(xì)胞中具有功能調(diào)控意義的磷酸化/去磷酸化調(diào)控系統(tǒng)。研究人員構(gòu)建了恒河猴的212個(gè)磷酸酶基因的siRNA庫, 并利用這一 siRNA 庫分別下調(diào)了分離自恒河猴大腦并經(jīng)純化培養(yǎng)的星狀膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的各磷酸酶的表達(dá), 在分析比較EV71在不同磷酸酶下調(diào)細(xì)胞中的增殖特征基礎(chǔ)上, 對若干可以通過其表達(dá)水平直接影響 EV71 增殖的磷酸酶做了進(jìn)一步分析。結(jié)果表明, 恒河猴星狀膠質(zhì)細(xì)胞中若干與調(diào)控信號通路相關(guān)的*磷酸酶和絲/*磷酸酶對EV71的增殖具有影響, 而病毒可能亦通過與這些磷酸酶的相互作用對所感染的星狀膠質(zhì)細(xì)胞的免疫反應(yīng)活性產(chǎn)生影響。
研究人員指出,這項(xiàng)研究實(shí)驗(yàn)表明, 使用經(jīng)過綜合質(zhì)量控制及效果評價(jià)而能夠有效下調(diào)所有細(xì)胞內(nèi)磷酸酶基因表達(dá)的 RNAi 技術(shù), 可以在星狀膠質(zhì)細(xì)胞中尋找并確定對 EV71 增殖具有重要作用的特定磷酸酶。這類磷酸酶包括了*磷酸酶、雙特異磷酸酶和絲/*磷酸酶共 11 個(gè), 它們與細(xì)胞內(nèi)多種信號的傳導(dǎo)及由此引起的轉(zhuǎn)錄調(diào)控等過程相關(guān)。這些磷酸酶均能單獨(dú)對 EV71 的增殖表現(xiàn)控制作用, 提示它們是病毒增殖必需的細(xì)胞成分。同時(shí), 這一研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明, 當(dāng) siRNA 干擾下調(diào)細(xì)胞內(nèi)這些磷酸酶基因的表達(dá)時(shí), 星狀膠質(zhì)細(xì)胞所具有的、在病毒感染刺激時(shí)改變某些淋巴因子分泌水平的特征性免疫反應(yīng)活性亦受到影響, 這些以 IL-6 為代表的淋巴因子的變化, 從另一方面提示了, 星狀膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)特定磷酸酶在表現(xiàn)對 EV71 增殖的控制作用之外, 亦同時(shí)涉及細(xì)胞針對病毒感染刺激而產(chǎn)生的, 表現(xiàn)為某些淋巴因子分泌上調(diào)的炎性免疫反應(yīng)。根據(jù)這些結(jié)果和基于一些臨床報(bào)道強(qiáng)調(diào)的 EV71 病理損傷涉及 CNS 中炎性反應(yīng)機(jī)制的探討, 可以推論, 星狀膠質(zhì)細(xì)胞中這些對 EV71 具有特定作用的磷酸酶的表達(dá)水平和其活性狀態(tài), 很可能在某種意義上影響了病毒感染CNS組織時(shí)所產(chǎn)生的, 通常表現(xiàn)為CNS炎性病理損傷的發(fā)生和變化機(jī)制。這項(xiàng)研究的結(jié)果為進(jìn)一步分析 EV71 感染恒河猴模型, 尤其是探索感染CNS及其所出現(xiàn)的病理損傷的機(jī)制, 提供了新的基礎(chǔ)和依據(jù)。               來源:生物通

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