《Nature Methods》盤點2011年度技術，選出了zui受關注的技術成果：人工核酸酶介導的基因組編輯（genome editing with engineered nucleases）技術。

除了基因組編輯以外，《Nature Methods》也整理出了2011年zui值得關注的幾項技術，分別為：單細胞技術（Single-cell methods）、功能基因組資源（Functional genomic resources）、糖蛋白組學（Glycoproteomics）、單倍體因果突變（Causal mutations in a haploid landscape）、單層光生物成像（Imaging life with thin sheets of light）、非模式生物（Non–model organisms）、光基礎電生理學（Light-based electrophysiology）和RNA結構（RNA structures ）。

其中單細胞或者單分子之類的技術幾乎每年都會出現(xiàn)在Nature Methods的這一名單中，比如去年的單分子結構分析技術（Single-molecule structure determination）。所謂單細胞技術很好理解，就是相對于群體細胞研究，針對單個細胞的研究技術，由于培養(yǎng)基或者機體中的細胞存在多樣性，或者說是異質性，這為許多實驗分析造成了障礙?？梢哉f，隨著現(xiàn)代生物學的發(fā)展，“平均值”這個詞已經(jīng)不能滿足我們的需要了，我們要了解細胞之間的差異性。

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然而要進行單細胞分析也困難重重，從技術上說也存在幾個方面的問題。首先無論是針對一個特異性大分子，還是在OMIC水平上進行分子分析，都存在單細胞提取物數(shù)量少，難以分析的困難，這甚至可以說是不可能完成的，因此增加靈敏度勢在必行。

除此之外高通量分析也是一個瓶頸，要想獲得單細胞分析確切的分析結果，研究人員必須快速而準確的分析多個細胞，這并不容易。另外單細胞分析也常常需要進行多種方式分析，這不僅是由于細胞存在于一種異質性環(huán)境匯總，而且也在同一時間，也需要測量多個參數(shù)。

不過值得慶幸的是，今年在這些方面都不斷有好消息傳出，比如質譜流式細胞分析技術，這種技術采用了同位素作為抗體標記，替代熒光探針，從而延伸了流式細胞儀的多元分析能力。這篇題為“Single-Cell Mass Cytometry of Differential Immune and Drug Responses Across a Human Hematopoietic Continuum”的文章由多倫多大學和斯坦福大學完成，他們采用同位素標記抗體，結合質譜分析的方法實現(xiàn)了同時對細胞表面多達一百種標記物的檢測。

通常采用的熒光抗體標記細胞表面蛋白結合流式細胞術檢測的方法，雖然能實現(xiàn)細胞分選，但只能夠同時識別6-10種不同顏色的熒光，且還需盡量避免發(fā)生熒光重疊。而這項研究通過這個可以稱為大量細胞計數(shù)法的方法，觀察了人類骨髓產(chǎn)生的不同形態(tài)細胞中及表面的34種物質，不但能正確歸類10多種不同類型的免疫細胞，還能觀察到各類免疫細胞的內部變化，從而預知可能發(fā)生的變化。這將有助于更快更廣泛的測量處方藥對人體細胞的反應及功效，提前發(fā)現(xiàn)細胞病變，研發(fā)出針對個人的治療藥物。

另外在基因表達分析研究中，數(shù)字逆轉錄酶PCR（digital reverse-transcriptase，生物通譯）技術，結合微流體設備也幫助實現(xiàn)同時監(jiān)控上百個單細胞中上百個基因的表達。今年的一項研究證明了這一點：Single-cell dissection of transcriptional heterogeneity in human colon tumors。這項有關腫瘤異質性的研究利用新技術對數(shù)百個結腸癌細胞進行了單細胞基因表達分析，由此獲得了人類結腸癌異質性圖譜。

隨著單細胞分析技術越來越多的用于解答生物問題，對于靈敏度和高通量的要求也在不斷增加，尤其是在大分子分析方面——這比DNA和RNA分析的需求更多，而且商業(yè)用途的需求也越來越多。

來源：生物通