大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)水平。用純化的大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素 1(ET-1)再與 HRP標(biāo)記的 ET-1抗體結(jié)合,形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)濃度。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
檢測(cè)范圍:
5μg/L -150μg/L
保存條件及有效期:
1 2-8℃。
2 6個(gè)月
五.標(biāo)本的保存:
2-8度下可以保存一周時(shí)間,-20度可以保存1個(gè)月左右。-80度可以保存1年以上。-196度可以保存10年以上。
注意事項(xiàng):
1. 在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。
2.建議新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。1-3天左右檢測(cè)的樣本可儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。如有特殊原因需要周期性收集?biāo)本,請(qǐng)將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存,避免反復(fù)凍融。
其他產(chǎn)品:人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA KIT
人可溶性CD38(sCD38)ELISA KIT
人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA KIT
人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA KIT
人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA KIT
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA KIT
人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA KIT
人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT
人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA KIT
人肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HB-EGF)ELISA KIT
人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA KIT
人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA KIT
人生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)ELISAKIT
人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA KIT
人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA KIT
人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)ELISA KIT
人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA KIT
人上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISAKIT
人可溶性粘附分子(Sam)ELISA KIT
人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA KIT
人可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKIT
人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA
人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA KIT
人多效生長(zhǎng)因子(PTN)ELISA KIT
人可溶性CD28(sCD28)ELISA KIT
人淋巴細(xì)胞因子ELISA KIT
人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA KIT
人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA KIT
人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA KIT
人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISAKIT
人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA KIT
人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA KIT
人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA KIT
人集落刺激因子(CSF)ELISAKIT
人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA KIT
人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA KIT
人CD14分子(CDl4)ELISA KIT
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