尼氏小體染色液細(xì)胞組織染色

商品介紹：

尼氏體(Nissl body)或稱尼氏小體是分布于神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的三角形或橢圓形小塊狀物質(zhì)，能被堿性染料如硫堇、甲藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。各種神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體，但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中，但不在于軸突和包體的軸丘。另外，尼氏體會因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化，尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)合成蛋白質(zhì)合成的重要部位，當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后，包體內(nèi)尼氏體會明顯減少。

商品屬性：

尼氏染色液(Nissl Stain，焦油紫法)采用焦油紫(Cresyl violet)作為核心染料，焦油紫具有感光作用，能夠很好地顯示尼氏體變化。主要優(yōu)點(diǎn)是操作簡便、染色穩(wěn)定、適用范圍廣，可用于石蠟組織切片的尼氏物質(zhì)、神經(jīng)元等的染色，尼氏體的存在和消失是神經(jīng)細(xì)胞是否受損的重要指標(biāo)，當(dāng)發(fā)生腦炎、腦缺血、軸突反應(yīng)等情況時，尼氏體會發(fā)生溶解甚至消失。

組份：

焦油紫染色液 100mL

分色液 100mL

操作步驟(僅供參考)：

1. 新鮮組織固定于乙醇、Carnoy 固定液或中性福爾馬林溶液后，常規(guī)脫水包埋。

2. 切片厚5μm（注意3），常規(guī)脫蠟至水。

3. 切片入焦油紫染色液中，將染缸置于37℃溫箱浸染10-30min。

4. 蒸餾水沖洗。

5. 入分色液中分化10s-20s，在顯微鏡下觀察至背景接近于無色為止。

6. 無水乙醇迅速脫水。二甲苯透明，中性樹膠封固。

7. 尼氏體:紫色;細(xì)胞核:淡紫色;細(xì)胞質(zhì):淡紫色。

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：