Caspase 2分光光度法檢測試劑盒細胞凋亡

商品介紹：

本試劑盒適用于培養(yǎng)細胞及新鮮組織caspase-2 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用。Caspase-2（Nedd2/ICH-1）是遺傳毒性壓力（genotoxic stress）誘導(dǎo)的細胞凋亡信號途徑中的啟動酶，可能對于caspase-9 和caspase-3 激活和凋亡的下游事件誘導(dǎo)有重要的意義。caspase-2 的表達與組織的發(fā)育階段有關(guān)，均表達于心臟、腎和腦。Caspase-2 分光光度法檢測試劑盒是將caspase-2 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團，當該底物被caspase-2 剪切后，發(fā)色基團即游離出來，可通過酶標儀或分光光度計（λ=405nm 或400nm）測定其吸光值，可考察caspase-2 的活化程度。

商品屬性：

注意事項

1. Caspase-2 Substrate 避光保存及使用。

2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-2 活化的機制，這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-2 活性無明顯改變，需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。

3. 細胞數(shù)量需達到3~5×106 個或新鮮組織50~100mg，以便能達到測定需要的100~200μg 蛋白的要求，因為Caspase-2 的活性與細胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測定的OD 值偏低，可通過增加細胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。

步驟和注意事項：?

準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復(fù)蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉(zhuǎn)染：?

準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：