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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞
規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 脊髓組織 |
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貨號 | CS-X3220 | 細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X3220 | 組織來源 | 脊髓組織 |
傳代特性 | 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 | 培養(yǎng)基 | 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞分離自脊髓組織;脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù);是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細(xì)胞,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細(xì)胞,神經(jīng)元含量少,分離純化難度大,且脊髓神經(jīng)元細(xì)胞是高度分化的終末細(xì)胞,不能分裂增殖,培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形,體積小,透亮,無突起。培養(yǎng)2-3d,可見胞體增大,突起增多延長;培養(yǎng)6-7d,細(xì)胞體大飽滿,突起明顯增加延長并交織成網(wǎng),光暈明顯,立體感強。培養(yǎng)20d后,死亡細(xì)胞明顯增加,細(xì)胞出現(xiàn)內(nèi)空泡,突起粗細(xì)不均,甚至脫壁,發(fā)生細(xì)胞崩解。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞采用膠原酶&yi酶聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml) 培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣 傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠脂肪細(xì)胞 | 人肝X受體α(LXRα)檢測試劑盒 |
Calu-1 (人肺癌細(xì)胞) | 人血管生成su2(ANG-2)檢測試劑盒 |
CFPAC-1 (人胰腺癌細(xì)胞) | 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)試劑盒ELISA |
COLO 201 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) | 人SMAD2 ELISA檢測試劑盒 |
CTLL-2 (小鼠T細(xì)胞) | 人皰疹病毒6型PCR試劑盒 |
DC2.4 (小鼠骨髓來源樹突狀細(xì)胞) | 伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒 |
EAC (小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) | 志賀菌ipaH 基因(bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 |
F9 (小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞) | 大腸埃希菌(大腸O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 |
GC-1 spg (小鼠精原細(xì)胞) | 螺源性成分PCR試劑盒 |
H-97 (人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) | 禽腺病毒(11型)PCR試劑盒 |
HCC 94 [HCC941122] (人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)) | 禽皰疹病毒1型PCR試劑盒 |
Hep G2 (人肝癌細(xì)胞) | 馬巴貝斯蟲PCR試劑盒 |
HEC-1-A (人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) | 小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞羅湖病毒(TiLV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
HFT-8810 (人胎兒細(xì)胞株) | 病毒HN(AIV-HN)核suan檢測試劑盒 |
HL-7702 [L-02; LO2] (人正常肝細(xì)胞) | 豬特定基因序列PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
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