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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	胎盤組織
貨號(hào)	CS-X3388	細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號(hào)	CS-X3388	組織來源	胎盤組織
傳代特性	可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞
2.組織來源：胎盤組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一種多能干細(xì)胞，是具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞像APSC多能細(xì)胞。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層。在機(jī)體正常的組織損傷修復(fù)過程中，MSC是一種重要的參與組織再生的細(xì)胞庫。在組織損傷引起的特殊信號(hào)作用下，MSC遷移到受損部位，在局部聚集增殖，依據(jù)不同的損傷信號(hào)沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴(kuò)增，體外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一種實(shí)用的組織修復(fù)種子細(xì)胞。相較于其他干細(xì)胞，胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞具有來源方便，細(xì)胞數(shù)量充足，易于分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和純化，傳代擴(kuò)增多代后仍具有干細(xì)胞特性。胎盤是干細(xì)胞的佳來源。

5.方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞采用yi蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無，而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲(chǔ)存后對細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

293FT (人胚腎細(xì)胞)	人巢蛋白1(NID1)檢測試劑盒
大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞	人新生兒促甲狀腺su(N-TSH)檢測試劑盒
大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞	人白喉抗體(Diphtheria Ab)試劑盒ELISA
大鼠胚肺成纖維細(xì)胞	人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA檢測試劑盒
大鼠胚胎成纖維細(xì)胞	洋蔥伯克氏菌PCR試劑盒
大鼠胚胎肝母細(xì)胞	腦心肌炎病毒PCR檢測試劑盒
大鼠胚胎干細(xì)胞	鴨源性成分Co基因(Duck-Co)檢測試劑盒
大鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞	難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒
大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞	孟氏尖旋線蟲PCR試劑盒
大鼠破骨細(xì)胞	諾沃克病毒RT-PCR試劑盒
大鼠浦肯野細(xì)胞	牛仰口線蟲PCR試劑盒
大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒
大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞	大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞美洲四棱線蟲PCR試劑盒
大鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞	牛型放線菌PCR試劑盒
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞	豬圓環(huán)病毒/偽狂犬病毒(PCV/PRV)核suan檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。