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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	腦組織
貨號	CS-X3374	細(xì)胞形態(tài)	神經(jīng)元細(xì)胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3374	組織來源	腦組織
傳代特性	屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群	培養(yǎng)基	含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	神經(jīng)元細(xì)胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞
2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動和內(nèi)分泌活動的較高級神經(jīng)中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區(qū)和視上區(qū)）﹑中部（結(jié)節(jié)區(qū)）和后部（乳頭體區(qū)）。下丘腦具有許多細(xì)胞核團(tuán)和纖維束﹐與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來自其他部位的神經(jīng)纖維有廣泛的突觸聯(lián)系，可以接受很多神經(jīng)沖動，為內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能，合成神經(jīng)垂體激素及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進(jìn)行體外培養(yǎng)，建立下丘腦神經(jīng)元體外實驗平臺具有重要意義。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞采用yi蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

NK細(xì)胞	人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)ELISA檢測試劑盒
U14 (小鼠子宮頸癌細(xì)胞)	人胎球蛋白A(FETU-A)檢測試劑盒
U-2 OS [U2OS] (人骨肉瘤細(xì)胞)	人白介su-1β前體(Pro-IL-1β)檢測試劑盒
U251 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)	人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移mei(GGT) ELISA Kit
U266 (人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞)	人免疫缺陷病毒1型M群B型RT-PCR試劑盒
U-87 MG (人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)	同艾特韋病毒PCR檢測試劑盒
U-937 (人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)	馬源性成分(Horse)核suan檢測試劑盒
UACC-812 (人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞)	貓衣原體PCR檢測試劑盒
UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細(xì)胞)	梅毒螺旋體梅毒亞種PCR試劑盒
UMR-106 (大鼠骨肉瘤細(xì)胞)	帕臘南病毒RT-PCR試劑盒
UM-UC-3 (人膀胱移行細(xì)胞癌)	瘧原蟲PCR檢測試劑盒
V79 (倉鼠肺細(xì)胞)	蜜蜂球囊菌PCR檢測試劑盒
USMC (大鼠血管平滑肌細(xì)胞)	大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞梅毒螺旋體PCR檢測試劑盒
VCaP (人前列腺癌細(xì)胞)	牛支原體（MYPB）PCR檢測試劑盒（熒光-PCR法）
VE (人血管內(nèi)皮細(xì)胞)	大豆內(nèi)源基因Lectin核suan檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。