污水處理設(shè)備 污泥處理設(shè)備 水處理過濾器 軟化水設(shè)備/除鹽設(shè)備 純凈水設(shè)備 消毒設(shè)備|加藥設(shè)備 供水/儲水/集水/排水/輔助 水處理膜 過濾器濾芯 水處理濾料 水處理劑 水處理填料 其它水處理設(shè)備
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閱讀:1255發(fā)布時間:2017-12-25
1.細(xì)胞爬片;
2.PBS清洗標(biāo)本 3次,各1 min。
3.冷丙酮4℃固定15min(或用4%多聚甲醛室溫固定10~20min);
4.空氣干燥5min,PBS漂洗3min,3次;
5.細(xì)胞通透:0.5% Triton X-100(溶于PBS)通透細(xì)胞,室溫15~30min(丙酮固定法不用此步驟);
6.PBS漂洗2次,每次5min;
7. 3% H2O2去離子水室溫孵育10min,PBS洗;
8.正常山羊血清封閉,37℃孵育10~20min,甩掉封閉液,勿洗;
9.加適當(dāng)比例的一抗工作液孵育,4℃過夜或37℃ 1~2h;
10.PBS漂洗2次,每次5min;
11.加入酶標(biāo)二抗工作液,37℃,30-60min;
12.PBS漂洗2次,每次5min;
13.加DAB顯色劑顯色(或AEC顯色),鏡下觀察結(jié)果,適時終止;
14.蘇木素輕度復(fù)染;
15.脫水透明。
16. 封片,中性樹膠封片。 光學(xué)顯微鏡觀察,拍片。圖象評分。
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