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閱讀:841發(fā)布時間:2018-1-29
血清在動物細(xì)胞培養(yǎng)中起著多方面的作用:
①提供細(xì)胞生存和增殖所必需的生長調(diào)節(jié)因子。
②補(bǔ)充基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量不足的營養(yǎng)成分。
③含有一些可供貼壁細(xì)胞型細(xì)胞貼壁生長的基質(zhì)成分。
④提供載體蛋白,可結(jié)合維生素、脂質(zhì)、金屬離子等。
⑤在一些情況下,中和毒性物質(zhì)保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
⑥給培養(yǎng)液提供良好的緩沖系統(tǒng)。
⑦提供蛋白酶抑制劑,保護(hù)細(xì)胞免受死細(xì)胞釋放的蛋白酶的傷害。
但是血清也存在一些弊端,比如存在不少有害成分(補(bǔ)體、免疫球蛋白和一些生長抑制因子等);血清成分不明確,影響對結(jié)果的分析;不同動物、不同批次的血清成分和活性有很大不同,使得培養(yǎng)結(jié)果不穩(wěn)定。
盡管如此,血清仍然是培養(yǎng)液中zui基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液。
血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動物細(xì)胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子(如表皮生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、類胰島素生長因子等);血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì),能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和貼附。因此,細(xì)胞培養(yǎng)時,要保證細(xì)胞能夠順利生長和增殖,一般需添加10%~20%的血清,動物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。
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