HL10366.2 v. A

人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說明書

主要用途

  人體血小板高純分離試劑是一種旨在通過等密度離心的方法，直接從人體全血樣品中分離出結(jié)構(gòu)完整而高度純化的血小板組分的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于人體（生理或病理）血小板的制備。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，純度可達(dá)99％。可以被用于凝集試驗(yàn)、功能檢測等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度保證。

技術(shù)背景

血小板（plaet），又稱為凝血細(xì)胞（thrombocytes），是一種小而形狀規(guī)則的細(xì)胞片段，直徑2至3微米。其前體為巨核細(xì)胞（megakaryocytes），平均生命周期5至9天。血小板在止血過程（hemostasis）中起著重要作用，幫助形成血液凝塊，同時(shí)也是多種生長因子，包括血小板源生長因子（plaet-derived growth factor）、轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor-β；TGF-β）、堿性纖維原細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor；bFGF）等的自然來源。體內(nèi)血小板數(shù)量和功能異常會(huì)產(chǎn)生血小板?。╰hrombocytopathy）：血小板過低（thrombocytopenia）或功能降低（thrombasthenia），將導(dǎo)致出血；過高（thrombocytosis）則容易產(chǎn)生血淤，而引起中風(fēng)、心肌梗塞、肺栓塞（embolism）。血小板的分離是現(xiàn)代血液學(xué)研究的zui常用的手段之一。福特（Ford）等使用等密度介質(zhì)（1.063克/毫升），通過低速離心，一步從紅細(xì)胞和白細(xì)胞中獲得純度更高、活性保證、結(jié)構(gòu)完整的血小板。 

產(chǎn)品內(nèi)容

高純液（Reagent A）   毫升

稀釋液（Reagent B）   毫升

產(chǎn)品說明書   1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；高純液（Reagent A），避免光照；嚴(yán)格無菌操作；有效保證6月

用戶自備

2毫升離心管：用于樣品操作的容器

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

4℃（微型）臺式離心機(jī)：用于樣品操作

實(shí)驗(yàn)步驟

• 準(zhǔn)備1個(gè)無菌的15毫升錐形離心管
• 搖勻試劑盒里的高純液（Reagent A）
• 移出xx毫升高純液（Reagent A）到15毫升錐形離心管
• 加入xx毫升稀釋液（Reagent B），混勻——此為高純工作液
• 小心沿著管壁，在高純工作液上面，一滴一滴加入5毫升新鮮抗凝全血樣品
• 室溫下，放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為350g（注意：避免使用快速制動(dòng)）
• 小心取出離心管：可見上端二分之一處黃色血漿和下端四分之一處紅色血細(xì)胞之間的混濁血小板樣品帶

• 小心抽去血小板樣品帶以上的血漿液體
• 小心收集血小板樣品帶到2毫升離心管（注意：置于血漿和血小板樣品帶交界處下緣小心緩慢抽吸）——
• 放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g
• 小心抽去上清液 
• （選擇步驟）加入xx至xx毫升稀釋液（Reagent B）
• （選擇步驟）放進(jìn)微型離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g
• （選擇步驟）小心抽去上清液
• 加入xx微升稀釋液（Reagent B），混勻
• 放進(jìn)－70℃冰箱里保存

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為10次（5毫升全血/次）操作
• 操作時(shí)，避免污染母液，尤其是高純液（Reagent A） 
• 操作時(shí)，須戴手套
• 建議使用新鮮抗凝全血
• 全血樣品采集建議使用EDTA二鉀血液抗凝液（HL12059.1）或ACD血液抗凝液（HL12059.4）， 
• 建議使用足夠的樣品量
• 血小板提取量因人而異；如果不足，建議增加全血量

8． 本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度（可達(dá)到99％）和產(chǎn)量zui為理想

9． 使用高純液（Reagent A）前，須搖勻后加入

10． 高純工作液zui低使用量為5毫升。大于5毫升血液樣品，與高純工作液1：1比例

11． 離心減速時(shí)，不得使用制動(dòng)方式

12． 為了避免紅細(xì)胞和白細(xì)胞污染，抽吸血小板樣品帶時(shí)，留出2至3毫米紅細(xì)胞與血小板交界處的液體（上圖藍(lán)色部分）

• 每毫升全血平均可獲得2 X 10⁸血小板
• 本公司提供系列血小板試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的血小板結(jié)構(gòu)完整
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的血小板維持正?；钚?/span>
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶