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上海星科生物科技有限公司
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閱讀:2713發(fā)布時(shí)間:2016-8-31
抗核抗體是以真核細(xì)胞的核成分為靶細(xì)胞的器官非特異性自身抗體的總稱,屬于自身抗體中的一組抗體。目前已經(jīng)衍生出了具有不同臨床意義的三十多種抗核抗體。
抗核抗體譜實(shí)際上是這些自身抗體的一個(gè)“大家族”?,F(xiàn)在已將抗核抗體譜分為六大類:
抗DNA抗體:抗雙鏈DNA抗體、抗單鏈DNA抗體
抗組蛋白抗體:抗ENA抗體:抗SM、RNP、SSA、SSB、scl70、jo-1等。
抗染色體DNA蛋白抗體:抗著絲點(diǎn)抗體
抗DNA組蛋白復(fù)合物抗體:狼瘡細(xì)胞、抗DNP抗體
抗非組蛋白抗體:抗組蛋白亞單位H1、H2A、H2B、H3、H4及其復(fù)合物抗體
抗核仁抗體:抗RNA多聚酶、原纖維蛋白等抗體
抗其他細(xì)胞成分抗體:抗核孔復(fù)合物、線粒體、高爾基體、溶酶體、板層素、肌動(dòng)蛋白中心體、紡錘體等。
這些自身抗體對(duì)風(fēng)濕性疾病,尤其對(duì)結(jié)締組織病的診斷、鑒別診斷及臨床治療具有重要幫助。
抗體稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗(yàn)前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復(fù)凍溶。
方法2. 實(shí)驗(yàn)前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預(yù)試驗(yàn)可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)zuijia的稀釋比例,再正式做,效果。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,可能會(huì)破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化 時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),可能會(huì)使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時(shí),目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
我司結(jié)合抗體的習(xí)性,與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合。不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。我司所售抗體具有高度的特異性,親和純化的蛋白的純化方法使實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)更。嚴(yán)格控制產(chǎn)品質(zhì)量,多種稀釋方法幫您調(diào)配抗體濃度。既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝、純度的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。
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