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小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒基本介紹:
酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法,簡(jiǎn)稱(chēng)酶聯(lián)免疫法,或者ELISA法。
它的中心就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合,然后通過(guò)顯色來(lái)檢測(cè)。
基本原理
①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來(lái)進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體
②酶標(biāo)記的抗原或抗體
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。
小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒ELISA檢測(cè)步驟
ELISA用血清來(lái)檢測(cè),首先血液要經(jīng)過(guò)至少半個(gè)小時(shí)的凝集,然后取血清。將酶復(fù)合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽(yáng)性對(duì)照,還有就是質(zhì)控品(這是嚴(yán)格的要求,它的范圍必須在質(zhì)控范圍內(nèi))。經(jīng)過(guò)一個(gè)小時(shí)的孵育,然后洗板,加底物,半個(gè)小時(shí)避光反應(yīng)后加終止液即完成反應(yīng)部分,然后就是讀數(shù)。由數(shù)值來(lái)判斷結(jié)果的陰性或陽(yáng)性。
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