馬血紅蛋白(HB) ELISA試劑盒子科現(xiàn)貨要想選對(duì)合適品牌的ELISA試劑盒,請(qǐng)您放心購(gòu)買我司ZIKER子科生物品牌試劑盒,高靈敏度、重復(fù)性,強(qiáng)特異性、操作性,值得您的選擇,讓您有一個(gè)滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果!
實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。
馬血紅蛋白(HB) ELISA試劑盒有兩種設(shè)定空白對(duì)照的方案:
(1)將 TMB 空白顯色孔設(shè)為對(duì)照。所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去 TMB 空白顯色孔的 吸光值后,在坐標(biāo)紙上畫出曲線,以吸光值作為縱坐標(biāo),以濃度作為橫坐標(biāo) 。
(2)將零孔設(shè)為對(duì)照。所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,得到的數(shù)據(jù)可以 直接在坐標(biāo)紙上畫出曲線。
注意:收到我公司產(chǎn)品請(qǐng)*時(shí)間確認(rèn)試劑盒是否有破損,酶標(biāo)板是否封閉,使用前 TMB顯色液應(yīng)為無(wú)色透明溶液,若發(fā)現(xiàn)顏色異常,或者其他問(wèn)題請(qǐng)及時(shí)與我司售后人員進(jìn)行,我們會(huì)*次安排進(jìn)行退換。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,底物請(qǐng)避光保存。使用之后所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,以免造成污染!
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