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小鼠孤啡肽(OFQ)ELISA檢測(cè)試劑盒

時(shí)間:2017-3-24閱讀:256
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試劑盒應(yīng)用:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)使用,不能用于臨床結(jié)果診斷,購(gòu)買(mǎi)使用前請(qǐng)跟我司客服人員進(jìn)行確認(rèn)。

保質(zhì)期:6個(gè)月(我司所有ELISA試劑盒均會(huì)提供批次出庫(kù))。

小鼠孤啡肽(OFQ)ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法: 
1、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 
4、 組織勻漿:將組織加入適量理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。 
5、 保存方法:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 

小鼠孤啡肽(OFQ)ELISA檢測(cè)試劑盒詳細(xì)操作步驟如下: 
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL; 
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。 6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 結(jié)果判斷:繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

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