雞尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA) ELISA試劑盒價格子科生物ZIKER-ELISA試劑盒品質(zhì)供應(yīng)商,供應(yīng)科研單位與課題實驗組,高品質(zhì)低價格,*,優(yōu)服務(wù)。我們力求對每一位客戶都付出100%的努力,100%的真誠!經(jīng)過多年來的努力,我們的客戶網(wǎng)絡(luò)遍布全國各地,用戶群體達上百萬人,得到了一致認可和好評,您的認可是我們前進努力的巨大動力!
雞尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA) ELISA試劑盒價格液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. 組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
雞尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA) ELISA試劑盒價格注意事項
⒈ 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
⒉ 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
⑴ 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當(dāng)前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
⑵ 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
⑶ 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
⑷ 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是當(dāng)前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
雞尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA) ELISA試劑盒價格氫離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(F型ATP酶)綠色熒光檢測試劑盒 20次
氫離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(P型ATP酶)綠色熒光檢測試劑盒 20次
氫離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(V型ATP酶)綠色熒光檢測試劑盒 20次
氫離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(F型ATP酶)藍色熒光檢測試劑盒 20次
氫離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(P型ATP酶)藍色熒光檢測試劑盒 20次
氫離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(V型ATP酶)藍色熒光檢測試劑盒 20次
鈉離子膜通道轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒 20次
鉀離子膜通道轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒 20次
鈣離子膜通道鈣泵(F型ATP酶/線粒體、葉綠體)功能熒光檢測試劑盒 20次
"鈣離子膜通道鈣泵PMCA(P型ATP酶/質(zhì)膜)功能熒光
檢測試劑盒" 20次
鈣離子膜通道鈣泵SERCA(P型ATP酶/內(nèi)質(zhì)網(wǎng))功能熒光檢測試劑盒 20次
鈣離子膜通道鈉鈣交換體(NCX/線粒體)功能熒光檢測試劑盒 20次
鈣離子膜通道鈉鈣交換體(NCX/質(zhì)膜)功能熒光檢測試劑盒 20次
鈣離子膜通道鈉鈣交換體(NCX/內(nèi)質(zhì)網(wǎng))功能熒光檢測試劑盒 20次
鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)利羅丁受體(ryanodine receptor;RyR)功能熒光檢測試劑盒 20次
鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)肌醇1,4,5-三磷酸受體(IP3R)功能熒光檢測試劑盒 20次
鈣離子膜通道二氫吡啶受體(DHPR)功能熒光檢測試劑盒 20次
鈣泵PMCA蛋白表達檢測試劑盒 20次
鈣泵SERCA蛋白表達檢測試劑盒 20次
鈣鈉交換體NCX蛋白表達檢測試劑盒 20次
RyR受體蛋白表達檢測試劑盒 20次
IP3R受體蛋白表達檢測試劑盒 20次
DHPR受體蛋白表達檢測試劑盒 20次
鎂離子膜通道轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒 20次
銅離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(P型ATP酶)綠色熒光檢測試劑盒 20次
5-羥色胺(Serotonin)轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒 20次
去甲腎上腺素(Norepinephrine)轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒 20次
多巴胺(Dopamine)轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒 20次
脂肪酸轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒 20次