雞脂聯(lián)素(ADP) ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)ELISA試劑盒檢測(cè)方法:雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、間接法測(cè)抗體、雙位點(diǎn)一步法、 競(jìng)爭(zhēng)法 、捕獲法、ABS-ELISA方法,我們子科生物主要采用雙抗體夾心法。詳細(xì)可以咨詢我們銷售人員。
樣本收集使用注意事項(xiàng):
●每個(gè)標(biāo)本量收集體積= 100ul × 檢測(cè)種類,如要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積= 100ul × 檢測(cè) 種類×2 。
● 對(duì)于作某一個(gè)具體指標(biāo)來(lái)說(shuō),先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測(cè)定,得出對(duì)實(shí)驗(yàn)有意義 的一個(gè)稀釋度(即測(cè)定劑量反應(yīng)曲線),然后用一個(gè)zui適稀釋度測(cè)定即可。
● 收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條 件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí), -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度 可保存 6 個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
● 血清標(biāo)本采集時(shí),應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì), 以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
●為了保證尿液檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,必須正確收集尿液標(biāo)本和保存。盛尿容器要清潔干燥。 使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染,影響檢 測(cè)結(jié)果。尿液標(biāo)本必須新鮮,留取后,應(yīng)及時(shí)檢測(cè)或保存,以免細(xì)菌繁殖。因在室溫中久 置后(尤其是夏季)尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測(cè)。
● 標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。 保存過(guò)久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。
● 凍結(jié)標(biāo)本融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛 倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。
● 混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。
● 反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以待測(cè)標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。也可 加入適當(dāng)防腐劑。
● 如果您在實(shí)驗(yàn)中遇到任何特殊問(wèn)題,敬請(qǐng)咨詢我公司深圳子科生物技術(shù)部。
雞脂聯(lián)素(ADP) ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。
雞脂聯(lián)素(ADP) ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)21-400.2 MGAP 20/sleeve 20個(gè)/包 MOLTOX
21-400.5 MGAP 500/case 500個(gè)/箱 MOLTOX
21-40S19.138 MGAP 6 Well Plates 5毫升/孔,2平板/包 MOLTOX
凍干S9:
11-01L.2 哺乳動(dòng)物微粒體酶(S9) 2.1毫升/瓶 MOLTOX
冷凍 S9:
11-101.1 哺乳動(dòng)物微粒體酶(S9) 1毫升/瓶 MOLTOX
11-101.2 哺乳動(dòng)物微粒體酶(S9) 2毫升/瓶 MOLTOX
11-101.5 哺乳動(dòng)物微粒體酶(S9) 5毫升/瓶 MOLTOX
11-105.2 S-9 SD PB/BNF KCl 2ml 2毫升/瓶 MOLTOX
14-103.1 S9 Human Liver Pooled 1mL 1毫升/瓶 MOLTOX
14-103.5 S9 Human Liver Pooled 5毫升/瓶 MOLTOX
15-03S.5 S-9 GSH Modified Aroclor 5ml 5毫升/瓶 MOLTOX
15-03SL.5 LS-9 GSH Mod. Aroclor 5ml 5毫升/瓶 MOLTOX
S9混合液:
11-401.3L MUTAZYME™ 30% 預(yù)制S9 3.25毫升/瓶 MOLTOX
11-401.6L MUTAZYME™ 30% 預(yù)制S9 6.75毫升/瓶 MOLTOX
11-402L MUTAZYME™ 10% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
11-403L MUTAZYME™ 5% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
11-404L MUTAZYME™ 10% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
11-405L MUTAZYME™ 5% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
S9混合液配置:
26-510.039A 磷酸鈉緩沖液; 0.1 M, pH 7.4 100毫升/瓶 MOLTOX
26-510.047A 磷酸鈉緩沖液; 0.1 M, pH 7.4 500毫升/瓶 MOLTOX
26-511 6-磷酸葡萄糖(G-6-P); 1.0 M 2毫升/瓶 MOLTOX
60-200.15 NADPH Regensys™ 試劑A 15毫升/瓶 MOLTOX
60-200.4 NADPH Regensys™ 試劑A 40毫升/瓶 MOLTOX
60-200.5 NADPH Regensys™ 試劑A 50毫升/瓶 MOLTOX
60-201.15L NADPH Regensys™ 試劑B 46毫克/瓶 MOLTOX
60-201.4L NADPH Regensys™ 試劑B 123毫克/瓶 MOLTOX
60-201.5L NADPH Regensys™ 試劑B 153毫克/瓶 MOLTOX
60-202 輔酶II 10克/瓶 MOLTOX
表型確認(rèn)培養(yǎng)基:
21-199 EC TRI PC VBE 5/sleeve 5個(gè)/包 MOLTOX
21-200 ST QUAD PC Plates 5/sleeve 5個(gè)/包 MOLTOX
21-201 Ampicillin Masters 5/sleeve 30毫升/平皿,5平皿/包 MOLTOX
21-202 Tetracycline Masters 5/sleeve 20毫升/平皿,5平皿/包 MOLTOX
21-203 His/Bio Master 30毫升/平皿,10平皿/包 MOLTOX