猴窖蛋白(CAV1) ELISA試劑盒標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
猴窖蛋白(CAV1) ELISA試劑盒
一般的生物標(biāo)本包括有:血液、體液、內(nèi)臟器官、糞便、胃液、活檢組織、組織提取液、天然孔分泌物及各種表達系統(tǒng)的表達產(chǎn)物等,一般為無菌操作,低溫保存(-80℃、液氮)。
一.如果采集的實質(zhì)器官則要求:
1、 器官實質(zhì)不能太小
2、 以采集實質(zhì)性病灶區(qū)為佳:如淋巴結(jié)、心臟、非、肺、脾以及腸管等病毒、病菌聚集的地方為佳
3、 同一病例裝入同一容器,并做好標(biāo)記
4、 應(yīng)在0-8℃的低溫儲存和運輸
5、 實質(zhì)性器官的處理:
5.1、取實質(zhì)性器官約0.5mg左右,充分剪碎或研磨
5.2、加入約500ul的/生鹽水,充分混勻
5.3、離心5000rmp x10min,去上清
5.4、-20℃保存,作為待檢標(biāo)本(切勿反復(fù)凍融)
二.體液(常見的包括血清、血漿、唾液以及尿液等)的處理方式
1、血液包括血漿和血清,它們的主要區(qū)別就是:血清凝血而血漿不凝血,所以它們的處理方式也就不一樣
1.1、采集血漿時一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽),采集后立即離心800-1000rmp x 5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />1.2、如要采集血清,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時后,800-1000rmp x 5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />2、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,但是一般飯后半小時內(nèi)不易采集,因為剛進食的唾液中富含豐富的唾液淀粉酶,的采集的時間時空腹采集;
3、尿液的采集方式基本和唾液一樣的,即現(xiàn)采現(xiàn)用,但是一般隔夜尿不采集;
4、組織提取液如肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmp x 5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br />三、糞便以及天然孔排泄物:采集后一般現(xiàn)用/生鹽水溶解,充分混勻,800-1000rmp x 5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
猴窖蛋白(CAV1) ELISA試劑盒操作步驟
1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進行。
2. 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準品的次序分別加入50μl的標(biāo)準品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品,空白對照加入50μl的蒸餾水;
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時;(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干;
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
11.各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);
結(jié)果判斷
1. 30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
2. 以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準品的濃度為橫坐標(biāo),繪制曲線圖;
3. 根據(jù)樣品的OD值查找對應(yīng)的濃度范圍;
猴窖蛋白(CAV1) ELISA試劑盒非凍型組織DNA保存液 100ml ZIKER子科生物
非凍型組織DNA保存液 250ml ZIKER子科生物
非凍型血液DNA保存液 100ml ZIKER子科生物
非凍型血液DNA保存液 250ml ZIKER子科生物
非凍型尿液DNA保存液 15ml ZIKER子科生物
非凍型尿液DNA保存液 100ml ZIKER子科生物
非凍型拭子DNA保存液 100ml ZIKER子科生物
非凍型拭子DNA保存液 100ml ZIKER子科生物
土壤腐殖酸清除劑 100ml ZIKER子科生物
一步離心式石蠟清除劑 100次 ZIKER子科生物
菌體內(nèi)毒素清除劑 200ml ZIKER子科生物
血液抗凝劑 100ml ZIKER子科生物
微型離心管研磨杵 50只 ZIKER子科生物
微型離心管研磨杵 50套 ZIKER子科生物
動物DNAout 100ml ZIKER子科生物
動物DNAout 250ml ZIKER子科生物
柱式動物DNAout 50次 ZIKER子科生物
大提柱式動物DNAout 4次 ZIKER子科生物
血液DNAout 50次 ZIKER子科生物
血液DNAout 150次 ZIKER子科生物
柱式血液DNAout 50次 ZIKER子科生物
大提柱式血液DNAout 4次 ZIKER子科生物
96孔板血液DNAout 1次 ZIKER子科生物
96孔板血液DNAout 5次 ZIKER子科生物
凝固血液DNAout 30次 ZIKER子科生物
凝固血液DNAout 100次 ZIKER子科生物
柱式凝固血液DNAout 50次 ZIKER子科生物
柱式毛發(fā)DNAout 50次 ZIKER子科生物
柱式骨骼DNAout 50次 ZIKER子科生物
柱式拭子DNAout 50次 ZIKER子科生物
一管式口腔拭子DNAout 20次 ZIKER子科生物