牛白介素10(IL10) ELISA試劑盒標(biāo)本要求： 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

自備物品
1.酶標(biāo)儀(盡量提前預(yù)熱)
2.微量加液器、吸頭
3.蒸餾水或去離子水以及濾紙；

牛白介素10(IL10) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
1.試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2．加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過(guò)多，可使用多道移液器。
3.孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育，嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4.洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，10分鐘左右)，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6.建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7.建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本)，如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn)，可和所購(gòu)經(jīng)銷商，如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

操作步驟
1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對(duì)照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對(duì)照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

結(jié)果判斷
1. 30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；
2. 以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制曲線圖；
3. 根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍；

牛白介素10(IL10) ELISA試劑盒庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
梭菌增菌培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
庖肉牛肉粒     BR 100g    瓶
卵黃瓊脂基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
MC培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
MRS肉湯     BR 250g    瓶
MRS培養(yǎng)基(莫匹羅星鋰鹽改良MRS培養(yǎng)基基礎(chǔ))     BR 250g    瓶
BBL瓊脂培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
TPY液體培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
Bolton肉湯基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)     BR 250g    瓶
Skirrow瓊脂     BR 250g    瓶
布氏肉湯     BR 250g    瓶
胰月示－亞硫酸鹽－環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)     BR 100g    瓶
0.1%蛋白胨水     BR 250g    瓶
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)     BR 250g    瓶
亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS)     BR 250g    瓶
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(藥典)     BR 250g    瓶
含鐵牛奶培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
水解酪蛋白胨(MH)肉湯     BR 100g    瓶
水解酪蛋白胨(MH)瓊脂     BR 250g    瓶
葡萄糖肉湯     BR 250g    瓶
胰化大豆瓊脂     BR 250g    瓶
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)     BR 250g    瓶
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基     BR 250g    瓶
改良EC肉湯(mEC+n)基礎(chǔ)     BR 250g    瓶