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牛白介素15(IL15) ELISA試劑盒實驗測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標準品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標板加上蓋,37℃反應 90 分鐘。
4.反應后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體;或甩去酶標板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應 20-25 分鐘 (注意:顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標儀在 450nm 測定 OD值。
牛白介素15(IL15) ELISA試劑盒ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法
1) 目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2) 以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3) 以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
牛白介素15(IL15) ELISA試劑盒1073-100 Caspase-2 Apoptosis Inhibitor, Z-VDVAD-FMK, 2 mM 100 ul BioVision 深圳子科生物
1073-20C Caspase-2 Apoptosis Inhibitor, Z-VDVAD-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1074-100 Caspase-9 Apoptosis Inhibitor, Z-LEHD-FMK, 2 mM 100 ul BioVision 深圳子科生物
1074-20C Caspase-9 Apoptosis Inhibitor, Z-LEHD-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1075-1000 Caspase-9 Fluorometric Substrate, Ac-LEHD-AFC 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1075-200 Caspase-9 Fluorometric Substrate, Ac-LEHD-AFC 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1076-1000 Caspase-9 Colorimetric Substrate, Ac-LEHD-pNA 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1076-200 Caspase-9 Colorimetric Substrate, Ac-LEHD-pNA 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1077-100 AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin] 100 mg BioVision 深圳子科生物
1078-100 pNA [p-Nitroaniline] 100 mg BioVision 深圳子科生物
1079-100 Caspase-12 Inhibitor, Z-ATAD-FMK 100 ul BioVision 深圳子科生物
1079-20C Caspase-12 Inhibitor, Z-ATAD-FMK 20 ul BioVision 深圳子科生物
1081-100 Caspase-1 (active) (human) (rec.) 100 Units BioVision 深圳子科生物
1081-25 Caspase-1 (active) (human) (rec.) 25 Units BioVision 深圳子科生物
1082-100 Caspase-2 (active) (human) (rec.) 100 Units BioVision 深圳子科生物
1082-25 Caspase-2 (active) (human) (rec.) 25 Units BioVision 深圳子科生物
1083-100 Caspase-3 (active) (human) (rec.) 100 Units BioVision 深圳子科生物
1083-25 Caspase-3 (active) (human) (rec.) 25 Units BioVision 深圳子科生物
1083-5 Caspase-3 (active) (human) (rec.) 5 ug BioVision 深圳子科生物
1083P-5 Procaspase-3 (human) (rec.) 5 ug BioVision 深圳子科生物
1084-100 Caspase-4 (active) (human) (rec.) 100 Units BioVision 深圳子科生物
1084-25 Caspase-4 (active) (human) (rec.) 25 Units BioVision 深圳子科生物
1085-100 Caspase-5 (active) (human) (rec.) 100 Units BioVision 深圳子科生物
1085-25 Caspase-5 (active) (human) (rec.) 25 Units BioVision 深圳子科生物
1086-100 Caspase-6 (active) (human) (rec.) 100 Units BioVision 深圳子科生物
1086-25 Caspase-6 (active) (human) (rec.) 25 Units BioVision 深圳子科生物
1087-100 Caspase-7 (active) (human) (rec.) 100 Units BioVision 深圳子科生物
1087-25 Caspase-7 (active) (human) (rec.) 25 Units BioVision 深圳子科生物