牛嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF) ELISA試劑盒試劑盒性能:
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月
結(jié)果判斷:繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
牛嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF) ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
下面分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法
1 、選擇試劑
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 、加樣
可能原因: 1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法: 1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 、孵育
可能原因: 1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
解決辦法: 1) 貼封片或加蓋; 2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 、洗板
可能原因: 1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。 3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
解決辦法: 1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5 、顯色
可能原因: 1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑; 2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。
解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流; 3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 、終止
可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 、讀板
如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。深圳子科生物已經(jīng)用于9年的技術(shù)研發(fā)經(jīng)驗(yàn),能極大的保障每個(gè)消費(fèi)者的售后技術(shù)服務(wù),讓您買的放心,用的放心!
牛嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF) ELISA試劑盒72-002.2L 凍干 WP2 uvrA pKM101
72-002.2L 凍干 WP2 uvrA pKM101 2顆/瓶 MOLTOX
72-002L 凍干 WP2 uvrA pKM101 10顆/瓶 MOLTOX
72-003.2L 凍干 WP2 trp uvrA pKM101 2顆/瓶 MOLTOX
72-003.5L
72-003L 凍干 WP2 trp uvrA pKM101 10顆/瓶 MOLTOX
72-187.5L 凍干 WP2 trp 5顆/瓶 MOLTOX
72-187L 凍干 WP2 trp 10顆/瓶 MOLTOX
72-188.2L 凍干 WP2 trpuvrA 2顆/瓶 MOLTOX
72-188.5L 凍干 WP2 trpuvrA 5顆/瓶 MOLTOX
72-188L 凍干 WP2 trpuvrA 10顆/瓶 MOLTOX
73-1535PSK TA1535pSK1002 Cells UMU Kit 1毫升/瓶 MOLTOX
底層瓊脂:
21-400.2 MGAP 20/sleeve 20個(gè)/包 MOLTOX
21-400.5 MGAP 500/case 500個(gè)/箱 MOLTOX
21-40S19.138 MGAP 6 Well Plates 5毫升/孔,2平板/包 MOLTOX
凍干S9:
11-01L.2 哺乳動物微粒體酶(S9) 2.1毫升/瓶 MOLTOX
冷凍 S9:
11-101.1 哺乳動物微粒體酶(S9) 1毫升/瓶 MOLTOX
11-101.2 哺乳動物微粒體酶(S9) 2毫升/瓶 MOLTOX
11-101.5 哺乳動物微粒體酶(S9) 5毫升/瓶 MOLTOX
11-105.2 S-9 SD PB/BNF KCl 2ml 2毫升/瓶 MOLTOX
14-103.1 S9 Human Liver Pooled 1mL 1毫升/瓶 MOLTOX
14-103.5 S9 Human Liver Pooled 5毫升/瓶 MOLTOX
15-03S.5 S-9 GSH Modified Aroclor 5ml 5毫升/瓶 MOLTOX
15-03SL.5 LS-9 GSH Mod. Aroclor 5ml 5毫升/瓶 MOLTOX
S9混合液:
11-401.3L MUTAZYME™ 30% 預(yù)制S9 3.25毫升/瓶 MOLTOX
11-401.6L MUTAZYME™ 30% 預(yù)制S9 6.75毫升/瓶 MOLTOX
11-402L MUTAZYME™ 10% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
11-403L MUTAZYME™ 5% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
11-404L MUTAZYME™ 10% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
11-405L MUTAZYME™ 5% 預(yù)制S9 20毫升/瓶 MOLTOX
S9混合液配置:
26-510.039A 磷酸鈉緩沖液; 0.1 M, pH 7.4 100毫升/瓶 MOLTOX
26-510.047A 磷酸鈉緩沖液; 0.1 M, pH 7.4 500毫升/瓶 MOLTOX
26-511 6-磷酸葡萄糖(G-6-P); 1.0 M 2毫升/瓶 MOLTOX
60-200.15 NADPH Regensys™ 試劑A 15毫升/瓶 MOLTOX
60-200.4 NADPH Regensys™ 試劑A 40毫升/瓶 MOLTOX
60-200.5 NADPH Regensys™ 試劑A 50毫升/瓶 MOLTOX
60-201.15L NADPH Regensys™ 試劑B 46毫克/瓶 MOLTOX
60-201.4L NADPH Regensys™ 試劑B 123毫克/瓶 MOLTOX
60-201.5L NADPH Regensys™ 試劑B 153毫克/瓶 MOLTOX
60-202 輔酶II 10克/瓶 MOLTOX